"MDA-PCa-2b細(xì)胞：人前列腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
收到常溫復(fù)蘇細(xì)胞后，具體操作步驟1)首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。2)用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。3)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。4)靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。5)貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。6)懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。溫馨提醒：1)可將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管中，備用；細(xì)胞首次傳代時(shí)，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。2)確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后，應(yīng)及時(shí)將部分細(xì)胞凍存，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失，影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。建議客戶收到細(xì)胞后前3天，100X、200X、400X各拍3張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于后續(xù)和技術(shù)支持溝通交流。
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞
RPMI #8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：He La細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、SKNBE-2細(xì)胞
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor細(xì)胞：-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞、A375細(xì)胞
SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞
P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
T/G HA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-433細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞
OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞
751-NA-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細(xì)胞、SW 480細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞
MDA330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞
MSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞
H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
LN-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞
KM12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Farage Original Line細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞、SW-839細(xì)胞
GES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293FT細(xì)胞、Hs832.Tc細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞
Psi2-DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca759細(xì)胞、UACC812細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞
TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞
OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞
DC 2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
UMNSAH/DF#1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149細(xì)胞、HELF細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞
STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞
BHK-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
IPEC-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞
OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞
MDA-MB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-53細(xì)胞、LA4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞
HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞
NCIH23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞
HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞
SU86_86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞
SW 948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial細(xì)胞： 1細(xì)胞
RPMI-8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epithelioma-2細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞、Turbot Embryonic細(xì)胞：細(xì)胞
BJA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3Ag1.2.3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞、BC-020細(xì)胞
QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞
SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH2細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞
SKCol1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細(xì)胞、NCIH250細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞
TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞
GM00215A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細(xì)胞、H2122細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞
NCIH1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞
MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
Hs 274細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細(xì)胞、TK-10細(xì)胞、AML 12細(xì)胞
WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、SJSA細(xì)胞
NCI-H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞
Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞
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