"Hs 766T細胞：人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２—１：８傳代，每周換液２—３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉移至培養(yǎng)箱內繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉移至液氮中保藏。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
HCCLM3細胞系相關產品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
NCI-H69細胞系相關產品：H735細胞、PL 45細胞、MHCC 97-H細胞
BHK21細胞系相關產品：MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
DMS79細胞系相關產品：RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
PaTu 8988 S細胞系相關產品：Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
EoL-1-cell細胞系相關產品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
CMT64細胞系相關產品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
NRK細胞系相關產品：DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
TMK-1細胞系相關產品：MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞
SKM1細胞系相關產品：QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞
JM1細胞系相關產品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
NCI-H1703細胞系相關產品：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
MES 23.5細胞系相關產品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
H-522細胞系相關產品：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
MRC-5細胞系相關產品：Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
SCC90細胞系相關產品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
SCC90細胞系相關產品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
NCI-H1092細胞系相關產品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
NCTC-1469細胞系相關產品：COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
IOSE 29細胞系相關產品：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
SW-1271細胞系相關產品：HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞
NB-9細胞系相關產品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
NCI-H2347細胞系相關產品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
Anip 973細胞系相關產品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
Jurkat-77細胞系相關產品：Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
EBTr細胞系相關產品：RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
OCI-Ly 19細胞系相關產品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
HCC9204細胞系相關產品：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
DOK細胞系相關產品：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
CF-1 MEF細胞系相關產品：Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
NK-92 MI細胞系相關產品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
U-343 MG細胞系相關產品：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞
DHL-6細胞系相關產品：MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞
PF382細胞系相關產品：FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
FOXNY細胞系相關產品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
Eca-109細胞系相關產品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關產品：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
ID8細胞系相關產品：IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞
C26細胞系相關產品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
WC00097細胞系相關產品：HCC0202細胞、MFE-296細胞、SEM細胞
Lewis Lung細胞系相關產品：WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
A2780CP70細胞系相關產品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
BHP 10-3細胞系相關產品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關產品：T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產品：Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
LTEP-a-2細胞系相關產品：BOWES細胞、SKNBE(2c)細胞、A498細胞
HPAF/CD18細胞系相關產品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
NCIH64細胞系相關產品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
NRK49F細胞系相關產品：SN4741細胞、GM04678細胞、3T3-L1 ad細胞
HCT-15細胞系相關產品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
SCC-15細胞系相關產品：MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞
Hs940.T細胞系相關產品：293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
RPTEC TERT1細胞系相關產品：786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
HCT/Taxo1細胞系相關產品：NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
TMD8細胞系相關產品：UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
Ly3細胞系相關產品：NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
SV40 MES 13細胞系相關產品：DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞
HEL 92.1.7細胞系相關產品：MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
A375-MEL細胞系相關產品：Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞
MDA.MB.231細胞系相關產品：PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞
Ha Fe細胞系相關產品：HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
SP2細胞系相關產品：CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞
PT-K75細胞系相關產品：KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關產品：AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
HFTF細胞系相關產品：HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞
Swiss-3T3細胞系相關產品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
KG1A細胞系相關產品：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
RPMI.8226細胞系相關產品：NCIH250細胞、KYSE 50細胞、KMB 17細胞
OC 316細胞系相關產品：SF-539 BT細胞、Nittby-Salford 1細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞
KYSE 30細胞系相關產品：P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
MC/CAR細胞系相關產品：A-2058細胞、ECGI10細胞、16-HBE14o細胞
OVCA432細胞系相關產品：KU 19-19細胞、HOS-143B細胞、ATDC-5細胞
BHK21細胞系相關產品：MHCC97細胞、MKN 28細胞、LU451細胞
CV 1細胞系相關產品：NU-GC-3細胞、MADB 106細胞、BNL CL.2細胞
"