"NCI-H82細胞：人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２—１：５傳代，每周換液２-３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：懸浮生長
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導致細胞集中成堆，將板順時針旋轉（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復延X軸Y軸分別水平搖動3次。
有關實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
D341Med細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
N2a細胞系相關產(chǎn)品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
BRL細胞系相關產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
Cor L51細胞系相關產(chǎn)品：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
Saos2細胞系相關產(chǎn)品：BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
Swiss3T3細胞系相關產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
HUT 125細胞系相關產(chǎn)品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
Eca 109細胞系相關產(chǎn)品：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
Human Embryonic Kidney 293細胞系相關產(chǎn)品：My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
Eca-109細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
H-125細胞系相關產(chǎn)品：U937細胞、MV4II細胞、P388細胞
OCI AML5細胞系相關產(chǎn)品：H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
SKHEP1細胞系相關產(chǎn)品：Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
SUDHL1細胞系相關產(chǎn)品：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
Hs737T細胞系相關產(chǎn)品：KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
HEY A8細胞系相關產(chǎn)品：ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
HEY A8細胞系相關產(chǎn)品：ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
CCRF SB細胞系相關產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
My-La 2059細胞系相關產(chǎn)品：U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞
Pt-K2細胞系相關產(chǎn)品：MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞
LCLC-103H細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
SK-Mel1細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
HME-1細胞系相關產(chǎn)品：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
P3/NSI/1-AG4-1細胞系相關產(chǎn)品：SW 1088細胞、Alexander細胞、CAL-148細胞
SW 579細胞系相關產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
H-2196細胞系相關產(chǎn)品：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
HTori-3.1細胞系相關產(chǎn)品：BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
TFK-1細胞系相關產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
HPAF II細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
MDA157細胞系相關產(chǎn)品：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞
hEM15A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
Strain L-929細胞系相關產(chǎn)品：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
NCIH358細胞系相關產(chǎn)品：NOMO-1細胞、Giant Cell Tumor細胞、COS-1細胞
WSU-HN13細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
SUM 149細胞系相關產(chǎn)品：Detroit-562細胞、CHL1細胞、HT(H9)細胞
PC 61細胞系相關產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
TE10細胞系相關產(chǎn)品：V-79-4細胞、GM12878細胞、MPC5細胞
mRTEC細胞系相關產(chǎn)品：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
HT-144細胞系相關產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
MDA-MB231細胞系相關產(chǎn)品：SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
RPMI #1846細胞系相關產(chǎn)品：KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞
H1651細胞系相關產(chǎn)品：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞
PL9細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞
SNU-354細胞系相關產(chǎn)品：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞
PVEC細胞系相關產(chǎn)品：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞
HUT125細胞系相關產(chǎn)品：MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
786O細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
HGF-1細胞系相關產(chǎn)品：PAN 02細胞、SNU-869細胞、JIMT-1細胞
NCIH1573細胞系相關產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
FET細胞系相關產(chǎn)品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
MDA 1386細胞系相關產(chǎn)品：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
MB157細胞系相關產(chǎn)品：SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
OB2細胞系相關產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
SKNSH細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞
HL60細胞系相關產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
CC-LP-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
B16-F10-BL6細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
WB-F344細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
LOUNH91細胞系相關產(chǎn)品：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
MCF7ADR細胞系相關產(chǎn)品：SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
KASUMI1細胞系相關產(chǎn)品：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞
H82sclc細胞系相關產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
PANC-1細胞系相關產(chǎn)品：HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma細胞：細胞
ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品：SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
SU-DHL6細胞系相關產(chǎn)品：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
7404細胞系相關產(chǎn)品：4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
D-324 Med細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-182細胞、HCT-116細胞、H2066細胞
D-283細胞系相關產(chǎn)品：NP69細胞、Me Wo細胞、RPE1-hTERT細胞
H498細胞系相關產(chǎn)品：MES-23.5細胞、MSTO-211H細胞、SUSM-1細胞
BRL細胞系相關產(chǎn)品：HEK293細胞、WM 451-Lu細胞、NCI-H3255細胞
MCF7細胞系相關產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、NCIH1915細胞、SUDHL-2細胞
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