"NCI-H1703細(xì)胞：人肺腺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞１９８７年建系，源自一位５４歲患有非小細(xì)胞肺癌的白人男性，該患者為吸煙者。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊撛趺催M(jìn)行解決？以下是國內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
HEK AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞
NCI-H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細(xì)胞、CPAE細(xì)胞、A-427細(xì)胞
A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞
OCI-Ly07細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-175細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞、U118MG細(xì)胞
P30/0HK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC3細(xì)胞、H2107細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞
X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H187細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞、H1930細(xì)胞
X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX1細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞、H-1581細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞
PFSK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H548細(xì)胞、RAW264細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞
bEND.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞
U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
RKO_AS45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、Saos2細(xì)胞
B16 melanoma F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH69細(xì)胞、OKT3細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
HT-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞
MEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞
F36P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa-2細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞、373MG細(xì)胞
RBE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞
MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞
OsACL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、LU65細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞、SC細(xì)胞
Bowes melanoma cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1187細(xì)胞、Panc327細(xì)胞、QGY-7701細(xì)胞
BDCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML2細(xì)胞、Plaepi 34細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞
HSAS4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細(xì)胞、C8166細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞
DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞
Hx-147細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB 985細(xì)胞、MES-23.5細(xì)胞、PG-4細(xì)胞
H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞、190PT細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞
HD11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞
H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞
NCI-H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：174xCEM.T2細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞、hEEC細(xì)胞
MOVAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159PT細(xì)胞、KHYG細(xì)胞、M-O7e細(xì)胞
RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞
DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞
MCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MONO-MAC 6細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、LS 513細(xì)胞
OCI-LY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細(xì)胞、L6細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
5-8F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852細(xì)胞、TE1細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞
SJRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEL細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞
WISH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN 93細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞
7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞
NIH 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞
LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞
NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
Leukemic 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細(xì)胞、H-1693細(xì)胞、Co320細(xì)胞
ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
GA-10 clone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388.D1細(xì)胞、Hs 636 T細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞
RS4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞
OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME.3M細(xì)胞、343 MG細(xì)胞、GM637細(xì)胞
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、AML 12細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞
A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2029細(xì)胞、G361細(xì)胞、Z310細(xì)胞
P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞
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