"HLF-a細胞：人肺細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液。【吹打分散細胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
VeroC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、CEMO-1細胞、EST81細胞
Pt K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse podocyte細胞、MHCC 97-H細胞、KM12細胞
RINm5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
alpha-TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞
NCI-H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
CD-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma F10細胞、NCIH1573細胞、RAEC細胞
PK-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIGI細胞、SK Mel28細胞、GB1細胞
HEK-293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞
SUDHL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss albino細胞、MPC-11細胞、GM0637細胞
Gerner 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
A549-Taxol細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
OCI-Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
HHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN6細胞、SKHEP1細胞、SPCA1細胞
UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞
GM03671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞
MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
OC316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細胞、WEHI-279細胞、Human Embryo Kidney-2細胞
GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
D-341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
P31-FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
NPA'87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
HuT-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
HITT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
Leghorn Male Hepatoma細胞：細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細胞、P-19細胞、COR-L 105細胞
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
SW-1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
H-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
HT-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
MS-751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細胞、COLO.205細胞、H847細胞
SaOS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2058細胞、HO8910PM細胞、LNCaP-FGC細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞
OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
AM38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
SW982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞
Large Cell Lung Cancer-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY-1細胞、A2780CP細胞、NCI-SNU-423細胞
WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞
HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
NCI-H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞
CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細胞、Jurkat-E6細胞、He-La細胞
HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細胞、L(TK-)細胞、KP-4細胞
VeroC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、HOS細胞、Panc05.04細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1618細胞、SO-RB50細胞、ZR751細胞
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