"Calu-6細胞：人肺退行性癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化２０分鐘。１：２。５-６天長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
收到常溫復蘇細胞后，具體操作步驟1)首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。2)用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。3)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。4)靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。5)貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。6)懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。溫馨提醒：1)可將培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基轉移至50ml無菌離心管中，備用；細胞首次傳代時，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。2)確認細胞狀態(tài)良好后，應及時將部分細胞凍存，再進行后續(xù)的實驗，避免后期實驗失誤可能發(fā)生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失，影響后續(xù)實驗。建議客戶收到細胞后前3天，100X、200X、400X各拍3張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于后續(xù)和技術支持溝通交流。
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要)，關鍵所在是細胞來源，血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
Sc-1細胞系相關產(chǎn)品：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
HEL-92-1-7細胞系相關產(chǎn)品：HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
WC00079細胞系相關產(chǎn)品：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
KYSE-270細胞系相關產(chǎn)品：MCA 38細胞、NCI-H2108細胞、GM02132C細胞
Vx-2細胞系相關產(chǎn)品：HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
JeKo-1細胞系相關產(chǎn)品：UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
MHHCALL2細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產(chǎn)品：Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
FAT細胞系相關產(chǎn)品：Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
HCV 29細胞系相關產(chǎn)品：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
V79-1細胞系相關產(chǎn)品：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
T24(ECV304)細胞系相關產(chǎn)品：Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
ARO-81細胞系相關產(chǎn)品：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞
U266 B1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
UMUC1細胞系相關產(chǎn)品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
UCLA NPA-87-1細胞系相關產(chǎn)品：SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞
PC-3M IE8細胞系相關產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
SCC-4細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1048細胞、TE7細胞、SUM-149PT細胞
IGR.OV1細胞系相關產(chǎn)品：HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞
NCI-SNU-216細胞系相關產(chǎn)品：KPL4細胞、ANA-1細胞、H4-II-EC3細胞
MLA 144細胞系相關產(chǎn)品：ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
MDA MB 231細胞系相關產(chǎn)品：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
NIHOVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
L929(NCTC)細胞系相關產(chǎn)品：C-26細胞、GP-293細胞、AHH1細胞
SuDHL 8細胞系相關產(chǎn)品：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞
B 95.8細胞系相關產(chǎn)品：NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
C38細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞
SUP-M2細胞系相關產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
Hs 821.T細胞系相關產(chǎn)品：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
DMS-153細胞系相關產(chǎn)品：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
MDA-MB 361細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
266 Bl細胞系相關產(chǎn)品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
OVCAR432細胞系相關產(chǎn)品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
NCIH1105細胞系相關產(chǎn)品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
NIH:OVCAR-10細胞系相關產(chǎn)品：RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞
AG06814-J細胞系相關產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
TE15細胞系相關產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
D324細胞系相關產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
MCF-12A細胞系相關產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
T-98G細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320DM細胞、TC7細胞、MV-522細胞
WEHI231細胞系相關產(chǎn)品：LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞
HRVEC細胞系相關產(chǎn)品：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
GM12878細胞系相關產(chǎn)品：KM-12細胞、COR-L26細胞、HDLM2細胞
PG-BE1細胞系相關產(chǎn)品：H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
ECC 10細胞系相關產(chǎn)品：LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞
KMM1細胞系相關產(chǎn)品：RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
HT3細胞系相關產(chǎn)品：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
MDA-330細胞系相關產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
CL-34細胞系相關產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
SK-GT-4細胞系相關產(chǎn)品：6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
Mel-MeWo細胞系相關產(chǎn)品：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
HCC1954 BL細胞系相關產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
HSC/mHSC細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
Bat lung細胞系相關產(chǎn)品：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
FaDu細胞系相關產(chǎn)品：Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
NG10815細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關產(chǎn)品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
HTori-3細胞系相關產(chǎn)品：LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
L 540細胞系相關產(chǎn)品：JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞
GM02219細胞系相關產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
Mc Coy細胞系相關產(chǎn)品：FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
SCLC21H細胞系相關產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
HSC細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
COLO-699細胞系相關產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
NCI-SNU-5細胞系相關產(chǎn)品：HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
Caco-2細胞系相關產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
NK-92細胞系相關產(chǎn)品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
Capan-2細胞系相關產(chǎn)品：H-1341細胞、NOR 10細胞、NG10815細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7/ADR細胞、HUCEC細胞、SW-1783細胞
LSECs細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H295細胞、Tca-8113細胞、HPDLF細胞
WC00079細胞系相關產(chǎn)品：A549ATCC細胞、VMM5A細胞、SNU-119細胞
P388.D1細胞系相關產(chǎn)品：Experimental Mammary Tumour-6細胞、CCD-19Lu細胞、TR146細胞
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