"JHH-7細胞：人肝癌細胞系

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞生長：貼壁

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系

細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分

細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。

HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞

HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞

H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、N87細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞

SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞

Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞

BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞

HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞

Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞

CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞

K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞

Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞

Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞

RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞

M-O7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞

NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞

HEK293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞

SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞

H-2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞

GM637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞

HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞

Kit-225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞

SKOV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞

HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞

RAMOS2G64C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞

SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞

HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞

CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞

D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞

Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞

PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞

SK RC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞

NCIH2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細胞、CCD1095Sk細胞、CT26.WT細胞

FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞

NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞

LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞

SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞

LM TK negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞

32D.cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細胞、LS-411N細胞、QBC939細胞

FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞

OAW42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞

PE CA PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞

SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞

MBT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞

HLE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC細胞、D10G41細胞、NB4細胞

143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞

SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞

PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞

PAI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞

H-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2 ad細胞、FHL124細胞、SK-BR3細胞

RS4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞、Colo741細胞、D10G41細胞

H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞

Sp2/O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞

McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞

PC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞

rRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞

OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞

Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞

MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞

MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞

High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞

J45.01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞

JHH-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細胞、Hs_578t細胞、HBE 135-E6E7細胞

R2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag1,2,3細胞、SW-620細胞、HOP-92細胞

MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞

VA-ES-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞

Mc Ardle 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞

FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞

H69/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞

CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞

PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞

WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、H23細胞

L 540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT1細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、BaF3細胞

H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、SKNBE2C細胞、T-84細胞

2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細胞、MGc80-3細胞、OVCA 432細胞

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