"SK-N-AS細胞：人腦神經母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：５-１：１０傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數板計數后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項】１)掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
有關實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
H-1581細胞系相關產品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
Hx147細胞系相關產品：343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
NCI-H157細胞系相關產品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
PANC 327細胞系相關產品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
Hs 688(A).T細胞系相關產品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關產品：SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞
VP267細胞系相關產品：Adult Retinal Pigment Epithelial細胞：-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關產品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
LOUNH91細胞系相關產品：CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
MC/9細胞系相關產品：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
253J-BV細胞系相關產品：VK2/E6E7細胞、RPE-1細胞、Michigan Cancer Foundation-7細胞
2780CP細胞系相關產品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
CV 1細胞系相關產品：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
NCI-SNU-119細胞系相關產品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
Strain L-929細胞系相關產品：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
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MonoMac1細胞系相關產品：HSC-3細胞、95C細胞、C38細胞
Z310細胞系相關產品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
H508細胞系相關產品：ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
ARPE-19細胞系相關產品：CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
HR-8348細胞系相關產品：MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關產品：U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞
NCIH295R細胞系相關產品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
Alpha Mouse Liver 12細胞系相關產品：KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞
MRC9細胞系相關產品：HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
SUDHL1細胞系相關產品：GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
BLO 11細胞系相關產品：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
NCI-H1755細胞系相關產品：BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
HEK AD293細胞系相關產品：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
IPEC-1細胞系相關產品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
CII細胞系相關產品：MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞
LIPF178C細胞系相關產品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
G519細胞系相關產品：NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
SW1990細胞系相關產品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
RBE細胞系相關產品：IGROV-1細胞、HEK 293 c18細胞、NS1-Ag4/1細胞
QGY 7701細胞系相關產品：NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞
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H1092細胞系相關產品：MM134細胞、C166細胞、MCF/Adr細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關產品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
NCI-H1915細胞系相關產品：NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
U-138 MG細胞系相關產品：NCIH196細胞、A549/DDP細胞、VMRCRCZ細胞
SK-MEL2細胞系相關產品：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
HFLS-OA細胞系相關產品：HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
50.B1細胞系相關產品：TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞
H82細胞系相關產品：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
NCIH28細胞系相關產品：SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
HEK293S細胞系相關產品：Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞
YD-38細胞系相關產品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
OAW 42細胞系相關產品：RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
NCI-H1648細胞系相關產品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
BNL-CL.2細胞系相關產品：NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞
DrG細胞系相關產品：H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
UACC-812細胞系相關產品：HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關產品：H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞
NCIH548細胞系相關產品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
SMMC-7721細胞系相關產品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
DMS 79細胞系相關產品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
PC-9/GR細胞系相關產品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
HCC38細胞系相關產品：NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
CCD 19Lu細胞系相關產品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
GLC-15細胞系相關產品：LLCMK2細胞、INS-1E細胞、He-La細胞
HSC/mHSC細胞系相關產品：Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
Sup T-1細胞系相關產品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
MRC-5細胞系相關產品：Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
SKCO 1細胞系相關產品：TE32細胞、JJN3細胞、MDA-MB 231細胞
TCCPAN2細胞系相關產品：HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
SW 480細胞系相關產品：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
NFS60細胞系相關產品：HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
L細胞系相關產品：PMVEC細胞、MESSADX5細胞、Hs895.T細胞
RKO-E6細胞系相關產品：RetroPack PT67細胞、CCC-HEL-1細胞、P3JHR-1細胞
NCI-H157細胞系相關產品：Tu 212細胞、KG-1細胞、Hx147細胞
C3H 10T1/2細胞系相關產品：T173細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
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