"B16細(xì)胞：小鼠黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞源于C５７BL/６J小鼠黑色素瘤，可以產(chǎn)生黑色素，同基因小鼠體內(nèi)移植可成瘤
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)(消化法)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程【原理】細(xì)胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞能繼續(xù)生長，同時也將細(xì)胞數(shù)量擴大，就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細(xì)胞進行各種實驗的必經(jīng)過程。懸浮型細(xì)胞直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞需經(jīng)消化后才能分瓶?！静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分裝于１５ ml無菌離心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回溫；３)新鮮培養(yǎng)基；４)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準(zhǔn)備操作】１)預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；２)用７５％酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；３)正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且可減少污染；４)點燃酒精燈：注意火焰不能太?。唬?準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶；６)取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)；７)從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面，再在鏡下觀察細(xì)胞；８)打開瓶口：將各瓶口一一打開，同時要在酒精燈上燒口消毒。
LN-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLK細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
SKUT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、HepG2細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
HCC9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7402細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞
MN-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細(xì)胞、H-838細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞
P3X63 AG8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、HELF細(xì)胞
SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞
JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞
H-920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM3細(xì)胞、SNU475細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞
MC3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞
Ramos.G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細(xì)胞、ONS-76細(xì)胞、HUC細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞
COLO680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HSF-1細(xì)胞、SNU182細(xì)胞、LS411N細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞
LU65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130 T細(xì)胞、H2405細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞
SBC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞
624-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、aNK細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞
GM02219D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMa-bm細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞
MES-23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
PCI-04B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 39細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞
KBM-7/Hap8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP3B2細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞
NCIH69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD 2細(xì)胞、H-1963細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞
H 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
SK Mel 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
GC-2spd(ts)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
G-292, clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766.T細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞、MT4細(xì)胞
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞
MDA-MB-468-RED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞
Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1395細(xì)胞、87 MG細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞
WILL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-128細(xì)胞、CORL279細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞
Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞
TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
AHH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細(xì)胞、DKMG細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞
HS852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-299細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞
RFL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
Jurkat clone A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞
P3J-HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF1細(xì)胞、HIEC6細(xì)胞、MCF7-GFP細(xì)胞
PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-4B細(xì)胞、KATO III細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞
RPMI 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞
CLL-CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW13細(xì)胞、H-441細(xì)胞、D341Med細(xì)胞
D 407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 15細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞、ECC12細(xì)胞
THP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細(xì)胞、WM115-mel細(xì)胞、MUTZ3細(xì)胞
SU-DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH8994細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞、H184A1細(xì)胞
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
TFK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞
SKUT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5 B1-4細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞
HEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、MC-4細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞
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