"C-33 A細胞：人子宮頸癌細胞系
細胞背景資料：C-３３A細胞株是N. Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細胞株(參見ATCC CRL-１５９４和ATCC CRL-１５９５)中的一株。 細胞一開始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細胞形態(tài)。 連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。 存在成視網膜細胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常。 P５３表達上調，且有一個２７３位密碼子的點突變導致Arg -> Cys的替換。 人乳頭瘤病毒DNA及RNA陰性。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內無CO2；2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
有關實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
Strain KB細胞系相關產品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
MN9D細胞系相關產品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
H1355細胞系相關產品：NBL-3細胞、SN-12C細胞、NCI-H250細胞
TPC1細胞系相關產品：TE-4細胞、Mono Mac 1細胞、U-373MG細胞
HOP 62細胞系相關產品：SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
THP-1細胞系相關產品：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
BJAB-1細胞系相關產品：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
Colo-206F細胞系相關產品：Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、V-79細胞、NCI-H1930細胞
SNK-1細胞系相關產品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
MKN28細胞系相關產品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
WM266mel細胞系相關產品：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
H-748細胞系相關產品：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關產品：JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
32D clone 3細胞系相關產品：A875細胞、MDA231-LM2細胞、N-9細胞
UMNSAH-DF1細胞系相關產品：PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞
PLA801-95C細胞系相關產品：NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞
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FU-97細胞系相關產品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
H2141細胞系相關產品：Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞
U251MG細胞系相關產品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
NCIH2135細胞系相關產品：MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關產品：AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
RPE-hTERT細胞系相關產品：alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞
Dakiki細胞系相關產品：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
JC細胞系相關產品：NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞
Hs 281.T細胞系相關產品：COLO-320-DM細胞、NCM460細胞、ARH-77細胞
PLC-8024細胞系相關產品：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
OVTOKO細胞系相關產品：RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
HSC6細胞系相關產品：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
H-1963細胞系相關產品：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
E.L.4細胞系相關產品：HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
C22 (Clara)細胞系相關產品：EFM-192C細胞、HCC1833細胞、NCI/ADRRES細胞
HBVP細胞系相關產品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
HUT 125細胞系相關產品：LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
WEHI3細胞系相關產品：Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
SKMel-5細胞系相關產品：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
A7r5細胞系相關產品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
NCI-H64細胞系相關產品：HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞
GM02219C細胞系相關產品：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
J111細胞系相關產品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
NCTC 3960細胞系相關產品：MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
SNU-387細胞系相關產品：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
SUM-190PT細胞系相關產品：SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞
HConEpic細胞系相關產品：Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
IPI-2I細胞系相關產品：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關產品：UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
DH82細胞系相關產品：IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
NCI-H2330細胞系相關產品：SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
M 1細胞系相關產品：32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞
IPLB-SF-21細胞系相關產品：Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
COR L279細胞系相關產品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
MOLM16細胞系相關產品：16-HBE14o細胞、CEM-CCRF細胞、HSF細胞
T173細胞系相關產品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
MDCC-MSB1細胞系相關產品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
X63-Ag8.653細胞系相關產品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
DR2R1610細胞系相關產品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
H1819細胞系相關產品：HEL細胞、NCI-H446細胞、NCI-H1395細胞
Gerner 7666細胞系相關產品：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞
KMB-17細胞系相關產品：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
HPC-Y5細胞系相關產品：GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
Hs683T細胞系相關產品：H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞
NCI-H196細胞系相關產品：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞
MC 116細胞系相關產品：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關產品：CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞
MCF-7B細胞系相關產品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
HT1080細胞系相關產品：PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
C643細胞系相關產品：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
SEM細胞系相關產品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
16-HBE細胞系相關產品：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞
GES-1細胞系相關產品：HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
GDM-1細胞系相關產品：MCF7-GFP細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、HIEC細胞
H2172細胞系相關產品：alphaTC clone 6細胞、WM266-4細胞、HCT-8/V細胞
H-1355細胞系相關產品：CCC-HIE-2細胞、OVCA432細胞、BC-022細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產品：MM-1S細胞、NCI.H460細胞、Hs746-T細胞
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