"SiHa細胞：人子宮頸鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：該細胞來源于一位日本病人的手術(shù)切除的腫瘤組織。電鏡下可以看到細胞間典型的橋粒和細胞質(zhì)中大量的張力絲。１９７５年發(fā)現(xiàn)有支原體污染，而后被去除。該細胞整合有HPV１６基因組，每個細胞中有１~２個拷貝。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
養(yǎng)了幾年細胞，說一點自己培養(yǎng)細胞方面的看法：１)培養(yǎng)細胞前，可以看看細胞特點說明書，包括細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細胞，就得細心呵護了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況；４)凍存細胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。１)不管買的細胞、惠贈的細胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細胞時; 細菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液。【分裝稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
MB 157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
MDA-MB-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
T-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
NCM356細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
H69/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞
VP 267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
KYSE450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞
2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞
RA-FLSs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞
COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞
SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
Eca109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
Human Liver-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
HeLa S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H82細胞、H676B細胞、Mink細胞
PE CA PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
NP-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞
Panc3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
NCI-H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
A375mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
Normal Rat Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞
Hs737T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
J-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞
SK-ES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
Hep-G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
PLA-802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
MGH-UI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞
H-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞
KG1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
WILL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-128細胞、CORL279細胞、OVCAR-4細胞
ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞
MEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞
SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
GM01232細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞
UCLA NPA871細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞
LS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
SNUC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCLCD細胞、251 MG細胞、IGROV 1細胞
SCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mREC細胞、Caco-2BBe細胞、Kit 225 K6細胞
MDA-MB-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432細胞、Turbot Embryonic細胞：細胞、SUDHL4細胞
NCIH250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG13細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、OUMS-23細胞
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