"BGC-823細胞：人胃腺癌細胞系
細胞背景資料：建自一位６２歲的胃癌患者
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
接收細胞相關(guān)問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復(fù)蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導(dǎo)致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
細胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細胞生物學(xué)實驗，細胞鋪板大概是我們最常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點經(jīng)驗。盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細胞懸液，沿孔壁（稍離開一點孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強或次數(shù)太多會導(dǎo)致細胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細胞以后(比如傳代好/分好細胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察消化細胞，若胞質(zhì)回縮，細胞之間不再連接成片，表明此時細胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓毎僮鳌浚?吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細胞吹打成細胞懸液；２)吸細胞懸液入離心管：將細胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液?！痉盅b稀釋細胞操作】１)顯微鏡下觀察細胞：倒置顯微鏡下觀察細胞量，必要是計數(shù)。注意密度過小會影響傳代細胞的生長，傳代細胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標記；２)分裝：將細胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
OCI/AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞
BSC-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
HRMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
HuT 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細胞、GM15452細胞、SW954細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
MGHU3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT.4細胞、WM-115細胞、NCIH1963細胞
CCK-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
CAL 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞
SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
HRA 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NCI-H2444細胞、L02細胞
L-5178-Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
NCIH1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888Lu細胞、LLC1細胞、NCI-H676細胞
SK-Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細胞、YH細胞、Mink Lung細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞
hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
NCIH596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞
MG63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞
SCC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2052細胞、COLO 320 DM細胞、SNG-M細胞
BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDAMB157細胞
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
SF-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
CF Pac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞
ND7/23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BA/F3細胞、LN229細胞、P3X63 Ag8細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
P3/NS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
Mv 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
CLL-CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
A375S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
NCIH358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO-1細胞、Giant Cell Tumor細胞、COS-1細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
CCD1112Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
NCM356細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
NCM356細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
CAL148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞
P 3 HR 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
NCI-H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
H510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-5細胞、PLB 985細胞、COLO-741細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
H-2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
HEK-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞
CCRF-CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞
NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、NCI-H1666細胞、159PT細胞
Panc 08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細胞、NCI.H522細胞、PA-1細胞
H4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細胞、NCI-H-295細胞、HCC44細胞
hESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、NCI-H2073細胞、RASMCs細胞
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