"BGC-823細(xì)胞：人胃腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：建自一位６２歲的胃癌患者
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不好），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺(tái)式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。【分裝稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會(huì)影響傳代細(xì)胞的生長(zhǎng)，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個(gè)培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時(shí)后開始貼附在瓶壁上。
MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞
OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞
H4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞、SNU761細(xì)胞
BSC-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/9細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
HRMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
HuT 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI 1細(xì)胞、GM15452細(xì)胞、SW954細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
MGHU3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT.4細(xì)胞、WM-115細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞
CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞
H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞
NCI-H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞、Scott細(xì)胞
CAL 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-4細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞、H1373細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞
Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87細(xì)胞、SNU761細(xì)胞、3396細(xì)胞
HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞
NCIH1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888Lu細(xì)胞、LLC1細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞
SK-Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma 22細(xì)胞、YH細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞
T/GHA-VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞、KOSC2細(xì)胞
B-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320DM細(xì)胞、SaOS細(xì)胞、RMS 13細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞
NCIH596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-212細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞、CL1細(xì)胞
MG63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1271細(xì)胞、VP 229細(xì)胞、SW 13細(xì)胞
SCC-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2052細(xì)胞、COLO 320 DM細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DCS細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞
MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
CF Pac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
TYK-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞
GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
P3/NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3LL細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞
Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞
CLL-CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW13細(xì)胞、H-441細(xì)胞、D341Med細(xì)胞
A375S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞
Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞
NOR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS-17/2.8細(xì)胞、H146細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞
GC-2spd(ts)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞
MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
NCIH358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO-1細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞、COS-1細(xì)胞
RSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞
CCD1112Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB1RGB細(xì)胞、BL6細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞
H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞
NCM356細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞
NCM356細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞
TE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞
V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞
CAL148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895T細(xì)胞、QG-56細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞
P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
NCI-H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rh30細(xì)胞、H-660細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞
H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-5細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞
H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞
H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞
HEK-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞
CCRF-CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-601細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞
NOZC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞
MCFs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、159PT細(xì)胞
Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞、PA-1細(xì)胞
H4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞、HCC44細(xì)胞
hESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞
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