"BT-549細(xì)胞：人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞１９７８年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系，源自一位７２歲患有乳腺導(dǎo)管癌的白人女性，來(lái)源組織包括乳頭及浸潤(rùn)導(dǎo)管。該細(xì)胞形態(tài)包括上皮樣細(xì)胞及多核巨細(xì)胞，可分泌一種粘性物質(zhì)。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說(shuō)一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說(shuō)明書(shū)，包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類(lèi)型等；２)不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同，有的生長(zhǎng)很快，比如說(shuō)MDA-MB-２３１，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿(mǎn)，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索了；３)對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過(guò)久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買(mǎi)的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話(huà)，細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢，買(mǎi)個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個(gè)人衛(wèi)生。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶(hù)遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類(lèi)的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(huà)(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤(rùn)洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過(guò)影響ECM相關(guān)酶的活性，來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過(guò)螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話(huà))，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見(jiàn)的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問(wèn)可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、H647細(xì)胞、HMSC細(xì)胞
X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞
Hep II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1581細(xì)胞、Anglne細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
PC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2細(xì)胞、HOP92細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞
4T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC40細(xì)胞、T173細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞
ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
OCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞、CL-11細(xì)胞
F56 [Human neoplasm]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
OCI-Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 49F細(xì)胞、HFT 8810細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞
HEL9217細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kato-III細(xì)胞、H1836細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞
P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞
P3X63 AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33細(xì)胞、P-2003細(xì)胞、PANC-10-05細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
UACC-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGC27細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞、NB19細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
MGH-U3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-K8細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞
Colon-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細(xì)胞、PM6細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞
TE-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-Jiyoye細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞
AM38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞、Co 205細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞
IHH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS5細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞
HCC1143細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、NL-20細(xì)胞、MDCK-II細(xì)胞
MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞
Hs578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細(xì)胞、A427細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
RWPE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞
HFL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA Paca2細(xì)胞、Panc 04.03細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞
Panc-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC3細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞
Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
SK-N-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細(xì)胞、IM-95細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞
HOSEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞、P-36細(xì)胞
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞
B 95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-4細(xì)胞、HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞
KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞
MC-CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞
Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞
HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
HEK293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞
TE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞、DLM8細(xì)胞
NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞
P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞
HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞
SKG3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細(xì)胞、B-3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞
T. T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞
CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
Mevo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞
COLO_320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HANK-1細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞、H22細(xì)胞
Y79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞
hMSC-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YT細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、TE4細(xì)胞
Hep G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU1細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
VERO C 1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1395細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
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