"ES-2細胞：人卵巢癌細胞系
細胞背景資料：ES-２細胞系源于一位４７歲黑人女性的臨床卵巢透明細胞癌手術(shù)標本。該細胞對中低劑量的阿霉素，順鉑，雙乙基亞硝脲，表鬼臼毒素吡喃葡糖苷等化療藥物有一定耐藥性。該細胞少量表達糖蛋白P。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天傳一次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞
CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
Hs706T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR786細胞、JC細胞、Panc02細胞
SK-MEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞
MAD109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
WEHI 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
ZR75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1522細胞、SCC VII細胞、HEC1-B細胞
P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞
hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
OV-2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
MDA436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞
TE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE細胞、U2-OS細胞、SuDHL 1細胞
2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
3D4/21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D CL3細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞、TFH細胞
PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
PANC-04-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞
MCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞
P3 88 D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
SK Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
H838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細胞、Hs 600.T細胞、AML-2細胞
CCRF-SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞
MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
MC3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
HCC-202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞
OCI Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDAMB436細胞、CESS細胞
CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
LS411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞
H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
EOL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
IMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
MDA PCa 2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
PANC.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
A2780 CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細胞、B958細胞、HELA-GFP細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
3AA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、LN299細胞、F9細胞
B958細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A.1細胞、C4-2 Bone metastatic細胞、NCI-H2195細胞
AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
ReNcell CX細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM06.A1細胞、U251MG細胞、P3-x63-Ag8 653細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
IM 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 J2細胞、16HBEo-細胞、PANC 203細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
EC-GI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
Bac12F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
BT.549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
ETCC-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、HS-294細胞、SW1353細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、SF295細胞、LAC細胞
CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細胞、H-735細胞、LS411細胞
NCI-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細胞、IR 983F細胞、HCC-1171細胞
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