"ES-2細(xì)胞：人卵巢癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：ES-２細(xì)胞系源于一位４７歲黑人女性的臨床卵巢透明細(xì)胞癌手術(shù)標(biāo)本。該細(xì)胞對(duì)中低劑量的阿霉素，順鉑，雙乙基亞硝脲，表鬼臼毒素吡喃葡糖苷等化療藥物有一定耐藥性。該細(xì)胞少量表達(dá)糖蛋白P。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，２-３天傳一次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊(cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說(shuō)一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過(guò)近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說(shuō)遇到過(guò)許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來(lái)，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來(lái)源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問(wèn)題，很多時(shí)候bottleneck沒(méi)有找到，雖然通過(guò)其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮鳎傆X(jué)得自己沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問(wèn)題。
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
SK-N-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細(xì)胞、IM-95細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞
CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞
CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞
RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞
Hs706T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR786細(xì)胞、JC細(xì)胞、Panc02細(xì)胞
SK-MEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞
MAD109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞
WEHI 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-8113細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞
ZR75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1522細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞
P3/X63/Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-5細(xì)胞、CTLL2細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞
MDA1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞、MN-60細(xì)胞
OV-2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞
MDA-MB-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞
MDA-MB-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞
MDA436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR106細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞
TE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞
2BS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞、H69細(xì)胞
NCIH1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細(xì)胞、H498細(xì)胞、H-847細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
PIGI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細(xì)胞、HS-683細(xì)胞、Y3細(xì)胞
NOZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細(xì)胞、NCI-H-69細(xì)胞、THP-1細(xì)胞
PANC-04-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-83細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞
MCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MONO-MAC 6細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、LS 513細(xì)胞
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細(xì)胞、TE671細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞
IMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P560細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞
SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞
SK Hep1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324MED細(xì)胞、Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞
H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞
CCRF-SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM 1細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、C12細(xì)胞
MDA-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA1細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞
MC3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2228細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞
NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞
HCC-202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4細(xì)胞、NB1-RGB細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞
OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
HTori3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞
LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞
H4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞、SNU761細(xì)胞
Vero E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細(xì)胞、T84細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞
EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞
IMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2009細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
MDA PCa 2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞
Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞
X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細(xì)胞、Leydig細(xì)胞、SW-962細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
PANC.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞
A2780 CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L88細(xì)胞、B958細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞
OVCAR.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞
TB-1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat細(xì)胞、b.End3細(xì)胞、D341MD細(xì)胞
3AA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、LN299細(xì)胞、F9細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞
AML-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Kelly細(xì)胞
MLFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Carcinoma-38細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞、MM1細(xì)胞
ReNcell CX細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM06.A1細(xì)胞、U251MG細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
IM 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 J2細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞
WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
CAL78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞、OEC19細(xì)胞
EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞
Bac12F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LCMS細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞、H-28細(xì)胞
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、SW1353細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、SF295細(xì)胞、LAC細(xì)胞
CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLFC細(xì)胞、H-735細(xì)胞、LS411細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞
"