"QGY-7701細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘，１：２,３天內(nèi)可長滿
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
【細(xì)胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結(jié)】支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中最常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細(xì)胞培養(yǎng)，無任何不良反應(yīng)。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理。建議如果細(xì)胞有可能是此種污染的話，可以增加細(xì)胞的種板密度，以提高細(xì)胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會長出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、118 MG細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞
MEL-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞
NCI522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞
HMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780CP細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞、KU.812細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
OVCAR4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞、H-2195細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞
578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME1細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞、HT 29細(xì)胞
578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME1細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞、HT 29細(xì)胞
MCF-7/AdrR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細(xì)胞、NCIH28細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞
MCF12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hs 68細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞、TM4細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞
143 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-407細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞、SKM-1細(xì)胞
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞
NSC34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2/cl.D1細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞
95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞、UO.31細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞
HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞
GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞
SK-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK 2細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
HCC-2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE-1細(xì)胞、SU-DHL-8細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞
LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
KYSE270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780CP細(xì)胞、P3JHR1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞
SP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1095Sk細(xì)胞、SW 13細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞
HO-8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞、T98G細(xì)胞
Rat Lung-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞
IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞、A375細(xì)胞
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞
Ketr-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
C6661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-8細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞、NS1細(xì)胞
MDA.MB.231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 203細(xì)胞、VP267細(xì)胞、KY70細(xì)胞
HCC-2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：746T細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞、253JBV細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞
H35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、RN細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞
NCIH2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞
Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
NCI-H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1819細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞
Line 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細(xì)胞、A375mel細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞
GM03190A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
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