"SK-MES-1細(xì)胞：人肺鱗癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：源于一位６５歲患有肺鱗狀細(xì)胞癌的白人男性，自轉(zhuǎn)移性胸腔積液分離而來(lái)。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
【懸浮型細(xì)胞的傳代操作】１)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心１０００rpm ５分鐘；２)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。【注意事項(xiàng)】１)嚴(yán)格的無(wú)菌操作；２)適度消化：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。附：EDTA(０.０２％四乙酸二鈉)消化液配方：EDTA ０.２０g，NaCl ８.００g，KCl ０.２０g，KH２PO４ ０.０２g，葡萄糖 ２.００g，０.５％紅４ml，加入蒸餾水定容至１０００ml。１０磅２０min高壓滅菌，使用時(shí)調(diào)節(jié)PH值到７.４。注意EDTA不能被血清中和，使用后培養(yǎng)瓶要徹底清洗，否則再培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞容易脫壁。
MOLM-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細(xì)胞、Sol8細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
HCa/16A3-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEP1細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞、RA.1細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞
Hs606T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細(xì)胞、H322細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞
16HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC38細(xì)胞、RASMC細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞
VK2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC細(xì)胞、H660細(xì)胞、C17細(xì)胞
ZR7530細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2-BBE細(xì)胞、293-F細(xì)胞、H-1092細(xì)胞
NCI-H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞、PK13細(xì)胞
SO-RB50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞
CWR22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞
HuLEC-5a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-M細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞
WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞
HCC-1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CemT4細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞
OCIAML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemia 1210細(xì)胞、HS-294細(xì)胞、HEL-92-1-7細(xì)胞
CEM-CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-8024細(xì)胞、A7r5細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞
SU-DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-522細(xì)胞、SW 579細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞
Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞
HDQ-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細(xì)胞、A-673細(xì)胞、HIEC細(xì)胞
IPLB-SF 21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細(xì)胞、Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-J2細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞
ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H187細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞、H1930細(xì)胞
Fu97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC/Y細(xì)胞、T 84細(xì)胞、LN 229細(xì)胞
Malme3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞
Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞
LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞
MESSA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞、MEG01細(xì)胞
OE-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞
Lewis-Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH187細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞
PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22Rv1細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞
CAKI.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞、HGMC細(xì)胞
SW 1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7404細(xì)胞、P-388細(xì)胞、LTPA細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞
P3-X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-11細(xì)胞、RMS1598細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞
NCI.H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE450細(xì)胞、751細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞
SUDHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-81細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞
2E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 8細(xì)胞、U-87細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO-81細(xì)胞、A2058細(xì)胞、AdHek細(xì)胞
H-209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞
JHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 153細(xì)胞、KCL22細(xì)胞、675T細(xì)胞
FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞
MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞
PC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞
NCIH1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞
SNU638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細(xì)胞、SP2-0-Ag14細(xì)胞、AD293細(xì)胞
BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細(xì)胞、UO.31細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCF細(xì)胞、H184A1細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞
STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
OPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-YN細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞
HT-1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：766T細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、HCT-8/V細(xì)胞
U87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、Chinese Hamster Lung細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞
SF539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞
KYSE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細(xì)胞、DF1細(xì)胞、LNCaP clone FGC細(xì)胞
RPMI 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
HCA 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細(xì)胞、WI38細(xì)胞、751-NA細(xì)胞
NCIH1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、MHCC97-L細(xì)胞
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