"NCI-H446細胞：人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞是１９８２年由CarneyD和GazdarAF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種，表達神經(jīng)元特有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；左旋多巴脫羧酶、蠶素、抗利尿激素、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。與正常細胞相比，該細胞c-mycDNA序列擴增約２０倍，RNA增加１５倍。最初傳代培養(yǎng)基用含有５%FBS的RPMI１６４０，另外添加１０nM化可的松、０.００５mg/ml胰島素、０.０１mg/ml轉(zhuǎn)鐵
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁/懸浮生長，混合
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
有關實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設計的，現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來為了某些細胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應用于各種細胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的，現(xiàn)在也廣泛應用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設計的，現(xiàn)在已廣泛應用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
SuperTube細胞系相關產(chǎn)品：H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關產(chǎn)品：U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
HCC 94細胞系相關產(chǎn)品：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
LC-1/sq細胞系相關產(chǎn)品：Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
HN6細胞系相關產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
CRFK細胞系相關產(chǎn)品：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
A253細胞系相關產(chǎn)品：RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產(chǎn)品：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
H-7721細胞系相關產(chǎn)品：TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞
Roswell Park Memorial Institute 1788細胞系相關產(chǎn)品：EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞
KP4細胞系相關產(chǎn)品：NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
OAW42細胞系相關產(chǎn)品：EAC細胞、M210B4細胞、MDA-MB-175-VII細胞
1E8-H細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 7666細胞、RBSMC細胞、LNCaP細胞
NT2細胞系相關產(chǎn)品：T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
SKRC 39細胞系相關產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
SKRC 39細胞系相關產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
EU-4細胞系相關產(chǎn)品：FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞
UWB1.289+BRCA1細胞系相關產(chǎn)品：Capan 1細胞、MDA-MB-435細胞、SUM149細胞
A-204細胞系相關產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
293 H細胞系相關產(chǎn)品：RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
786-0細胞系相關產(chǎn)品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
SHEE細胞系相關產(chǎn)品：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關產(chǎn)品：SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞
MPC11細胞系相關產(chǎn)品：GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
TGW-nu-1細胞系相關產(chǎn)品：Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
A498細胞系相關產(chǎn)品：H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
C3A細胞系相關產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
WM-266-mel細胞系相關產(chǎn)品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
EAhy 926細胞系相關產(chǎn)品：SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
KTC1細胞系相關產(chǎn)品：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
LN299細胞系相關產(chǎn)品：Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
RH7777細胞系相關產(chǎn)品：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
YAC-1細胞系相關產(chǎn)品：THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
HGE細胞系相關產(chǎn)品：Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞
ONS-76細胞系相關產(chǎn)品：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
Anip-973細胞系相關產(chǎn)品：D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
SJSA-1細胞系相關產(chǎn)品：PECAPJ34細胞、HAC-84細胞、MDA.MB.435細胞
MA-104細胞系相關產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
PTK-2細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
BT細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
PF-382細胞系相關產(chǎn)品：HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
A10細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
Hs695細胞系相關產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
PGLH7細胞系相關產(chǎn)品：CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
SW839細胞系相關產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
HSAS3細胞系相關產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞
RGC-6細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
SuDHL 10細胞系相關產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
H-2087細胞系相關產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
SKNBE2細胞系相關產(chǎn)品：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞
S.B.細胞系相關產(chǎn)品：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
L- cell細胞系相關產(chǎn)品：UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
GBC-SD細胞系相關產(chǎn)品：Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
MUS-M1細胞系相關產(chǎn)品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
Mono-Mac-6細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
CAL51細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
U-373 MG細胞系相關產(chǎn)品：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
Mel526細胞系相關產(chǎn)品：LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
Jurkat E6.1細胞系相關產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
SNU5細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞
L929細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
SNU-1040細胞系相關產(chǎn)品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
Hs445細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
TE-32細胞系相關產(chǎn)品：P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞
U266細胞系相關產(chǎn)品：MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2106細胞、MGECs細胞、PT-K75細胞
JB6 Cl 30細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HSC2細胞、Hs604T細胞
HCC 70細胞系相關產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細胞、NCI-H82細胞、RAW 264.7細胞
X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品：E6-1細胞、COLO 699細胞、LLCMK2細胞
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