"LoVo細胞：人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：LoVo建自１９７１年，從診斷為結(jié)腸腺癌的５６歲男性白人的一個轉(zhuǎn)移到左鎖骨上區(qū)的腫瘤結(jié)節(jié)建系。癌基因Ｃ-myc,K-ras,H-ras,N-ras,Myb,sis和fos的表達呈陽性。癌基因N-myc的表達未做檢測。它在裸鼠中能成瘤。與１０７細胞聯(lián)合皮下接種５只裸鼠２１天后全部成瘤。表達腫瘤特異的核基質(zhì)蛋白蛋白CC-３和CC-４。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
接收細胞相關問題：如不能在收到細胞后及時操作細胞，T２５及離心管發(fā)貨的細胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認干冰未完全升華時將細胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請即刻復蘇細胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細胞盡快適應培養(yǎng)箱環(huán)境，同時使部分因運輸導致脫落的細胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細胞在運輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導致細胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細胞。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
HCCC9810細胞系相關產(chǎn)品：Hs 840.T細胞、MEL細胞、Human Lung Microvascular Endothelial細胞：-5a細胞
DC 2.4細胞系相關產(chǎn)品：526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
HSC-3細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞
PANC-02-03細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
PTK-1細胞系相關產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
TGBC11TKB細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
SK.MEL.28細胞系相關產(chǎn)品：H-1770細胞、U-251細胞、Z138細胞
Loucy細胞系相關產(chǎn)品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
H-4細胞系相關產(chǎn)品：MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
HCGC細胞系相關產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
NCI-H647細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid細胞： No. 6細胞
HCAEC細胞系相關產(chǎn)品：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
H-740細胞系相關產(chǎn)品：UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關產(chǎn)品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
LS 174 T細胞系相關產(chǎn)品：WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
HEK-293-F細胞系相關產(chǎn)品：201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
HEK-293-F細胞系相關產(chǎn)品：201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關產(chǎn)品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
Ramos-RA1細胞系相關產(chǎn)品：H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
SKRC-42細胞系相關產(chǎn)品：H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
P-36細胞系相關產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
HEK-293F細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞
GBCSD細胞系相關產(chǎn)品：Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
USMC細胞系相關產(chǎn)品：UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
LP-1細胞系相關產(chǎn)品：KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
LAD 2細胞系相關產(chǎn)品：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
PANC-10-05細胞系相關產(chǎn)品：SNU-878細胞、TGBC11TKB細胞、B16 BL6細胞
Kasumi 1細胞系相關產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
Farage Original Line細胞系相關產(chǎn)品：IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
KBM-5細胞系相關產(chǎn)品：BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞
HCC0044細胞系相關產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
AA-Mel細胞系相關產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
HT22細胞系相關產(chǎn)品：Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞
BRL細胞系相關產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞
H-838細胞系相關產(chǎn)品：CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
SCC090細胞系相關產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
SCC090細胞系相關產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
Hs1.Tes細胞系相關產(chǎn)品：hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞
Panc3_27細胞系相關產(chǎn)品：PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞
A-253細胞系相關產(chǎn)品：RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
A673細胞系相關產(chǎn)品：MKN1細胞、SHI-1細胞、UCW 100細胞
HeLa/DDP細胞系相關產(chǎn)品：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞
33604細胞系相關產(chǎn)品：KMS-18細胞、H-711細胞、U118細胞
UMC11細胞系相關產(chǎn)品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
8226/S細胞系相關產(chǎn)品：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
PJ34細胞系相關產(chǎn)品：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
Nb2a細胞系相關產(chǎn)品：CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
EC-GI細胞系相關產(chǎn)品：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞
HCAEC細胞系相關產(chǎn)品：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
526細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞
AG06814-M細胞系相關產(chǎn)品：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
SUDHL2細胞系相關產(chǎn)品：L-M (TK-)細胞、SV-HUC細胞、NCTC929細胞
HCC-95細胞系相關產(chǎn)品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
HS0578T細胞系相關產(chǎn)品：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞
NCI-H69C細胞系相關產(chǎn)品：SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞
NCI-H69C細胞系相關產(chǎn)品：SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞
BpRc1細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞
HCET細胞系相關產(chǎn)品：NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
OV90細胞系相關產(chǎn)品：McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞
Panc 10.05細胞系相關產(chǎn)品：U373-MG細胞、CMT-93細胞、SNUC2A細胞
GM07404細胞系相關產(chǎn)品：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞
MDCK.2細胞系相關產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
TB1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：SK_HEP1細胞、P3HR-1細胞、LA-N-1細胞
MHH-CALL-2細胞系相關產(chǎn)品：HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞
FDCP-1細胞系相關產(chǎn)品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
SCC9細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2135細胞、CCD-841-CoTr細胞、NIH:OVCAR-10細胞
RH-35細胞系相關產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
Capan2細胞系相關產(chǎn)品：H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞
CCD-18Co細胞系相關產(chǎn)品：TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞
5637細胞系相關產(chǎn)品：2T細胞、HUSMC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
HCC-1833細胞系相關產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、KALS1細胞、HTori-3.1細胞
HSC2細胞系相關產(chǎn)品：HUT125細胞、NUGC4細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
SF-767細胞系相關產(chǎn)品：Hep 2細胞、CCD 1112SK細胞、Bowes melanoma cells細胞
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