"WSU-DLCL2 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：彌漫大B淋巴瘤；男性 
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：①進(jìn)無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng)，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點(diǎn)是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對(duì)各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉，熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：懸浮 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
WSU-DLCL2 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液（92%血清）2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量?jī)龃嬉?，用吸管吹打制成?xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮 
WSU-DLCL2 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞 
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 19細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞、SCC25細(xì)胞 
ECC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞 
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞 
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞 
COLO206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞 
COLO 678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞 
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞 
WM-239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞、2PK3細(xì)胞 
U-251_MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞、A673細(xì)胞 
H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞 
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞 
P-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 15細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞 
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞 
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞 
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞 
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞 
BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞 
HTori3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞 
HKC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細(xì)胞、PL9細(xì)胞、BL1339細(xì)胞 
WSU-DLCL2 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
GM03570細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Onda 11細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞、Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞 
SW-403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1a細(xì)胞、HSC5細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞 
NCIH187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞 
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞 
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞 
LS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞 
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞 
NCI-SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-2細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞、H-1417細(xì)胞 
KP-N-YN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-954細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、COV504細(xì)胞 
Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞 
NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞 
RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞 
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞 
Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞 
253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞 
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞 
CCRF SB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞、A101D細(xì)胞 
Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細(xì)胞、U 266細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞 
ARH-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL-6細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞 
GM0637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞 
HLEB3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細(xì)胞、2780CP細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞 
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞 
TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞 
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞 
VP229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1222細(xì)胞、HUT 226細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞 
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞 
Soleus clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞 
T173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞 
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞 
SGC-7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞 
HCS-2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 c18細(xì)胞、PVEC細(xì)胞、GM03570細(xì)胞 
CA-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T15細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞、L6565細(xì)胞 
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞 
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞 
RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H920細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、A3細(xì)胞 
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞 
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞 
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞 
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞 
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞 
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞 
WSU-DLCL2 人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞 
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞 
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞 
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞 
OS-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細(xì)胞、SF-767細(xì)胞、3T6細(xì)胞 
NCI-H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞 
NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞 
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞 
LC-2-Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細(xì)胞、HLFa細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞 
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-62細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、ANA1細(xì)胞 
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞 
ECC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞 
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