"WEHI-3 小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：白血?。籅ALB/c 
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。 
細(xì)胞生長：懸浮 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
WEHI-3 小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法5min還不能消化），這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會對你越來越不好。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：懸浮 
WEHI-3 小鼠白血病細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
Namalva細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nakata-1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞 
D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞 
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞 
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞 
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞 
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞 
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞 
KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞 
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞 
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞 
MBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、alphaTC1 Clone 6細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞 
NCI N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC-803細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞 
Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞 
KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HVSMC細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞、QG-56細(xì)胞 
PTK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞 
H-650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞 
U 266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-4細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞 
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞 
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞 
OVCA420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H 9細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞 
WEHI-3 小鼠白血病細(xì)胞系
ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞 
Hs 578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1171細(xì)胞、Tu686細(xì)胞、J82細(xì)胞 
NTERA2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細(xì)胞、H378細(xì)胞、BT-549細(xì)胞 
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞 
KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞 
GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞 
LICR-LON-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-38細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞、H2023細(xì)胞 
OCI-AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320DM細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞、HNE1細(xì)胞 
B 95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-4細(xì)胞、HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞 
NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞 
Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞 
KYSE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1573細(xì)胞、BJ1細(xì)胞、H1299細(xì)胞 
Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞 
MEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞 
NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、EBC1細(xì)胞 
U-2 OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-0細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞 
E.L.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL9217細(xì)胞、HEL299細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞 
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞 
HNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞 
GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞 
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞 
CaES-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞、H211細(xì)胞 
Ej138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細(xì)胞、MB-49細(xì)胞、G422細(xì)胞 
HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞 
HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞 
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞 
CORL105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞 
SCCVII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373MG ATCC細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞、SiHa細(xì)胞 
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞 
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞 
C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLM8細(xì)胞、TE13細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞 
KYSE0520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-1細(xì)胞、RM-1細(xì)胞、S16細(xì)胞 
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞 
NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞 
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞 
MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞 
Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞 
Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞 
EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞 
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞 
WEHI-3 小鼠白血病細(xì)胞系
BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞 
639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞 
T8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-65細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞、RCC23細(xì)胞 
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞 
NCIH1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888Lu細(xì)胞、LLC1細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞 
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞 
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞 
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞 
NCI-H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞、H-441細(xì)胞 
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞、MB49細(xì)胞 
BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞、SF295細(xì)胞 
H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2-Luc細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞 
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