"RFL-6 大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胚肺；成纖維細(xì)胞；SD大鼠 
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時(shí)仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動(dòng)作要輕、準(zhǔn)確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時(shí)要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來(lái)水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時(shí)以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時(shí)后立即用自來(lái)水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來(lái)水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時(shí)，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來(lái)水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當(dāng)蒸氣成直線上升時(shí)，關(guān)閉安全閥，當(dāng)指針指向１５磅時(shí)，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來(lái)蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來(lái)蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時(shí)后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來(lái)水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
RFL-6 大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣的，大家爭(zhēng)取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比)4)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況把握）。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁 
RFL-6 大鼠成纖維細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書 
NUGC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL-2細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞 
H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞 
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞 
b.End3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 6細(xì)胞、C1498細(xì)胞、8305-C細(xì)胞 
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞 
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞 
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞 
WBF344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細(xì)胞、TF-1細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞 
P3/ag細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECCL-1細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞 
H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞、293F細(xì)胞 
MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞 
253JBV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT549細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞 
WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞 
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞 
D562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細(xì)胞、HFT8810細(xì)胞、SHSY5Y細(xì)胞 
GP5d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞 
HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞 
IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞 
28SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞、COLO201細(xì)胞 
CCC-HSF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McArdle RH-7777細(xì)胞、UMNSAH-DF-1細(xì)胞、2780細(xì)胞 
RFL-6 大鼠成纖維細(xì)胞系
SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN4細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞、MC38細(xì)胞 
Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞 
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞 
H-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190細(xì)胞、HT1197細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞 
RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞 
H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-100細(xì)胞、PC 61細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞 
COLO-320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-812細(xì)胞、G-401細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞 
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞 
751-NA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞、138MG細(xì)胞 
QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞 
NCI-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細(xì)胞、H226細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞 
H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞 
HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、U266B1細(xì)胞 
JIMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞 
MDA-MB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞 
VP 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細(xì)胞、BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞 
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞 
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞 
IPLB-SF 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞 
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞 
Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞 
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞 
BJ [Human fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞 
RT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRFCEM細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞 
Rat1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、SW 780細(xì)胞 
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞 
HRMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-90細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞 
H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞 
U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞 
H-810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-42細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞、H 9細(xì)胞 
TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞 
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞 
H-1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細(xì)胞、IOSE 80細(xì)胞、U343MG細(xì)胞 
Jurkat-FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-1細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞、H-508細(xì)胞 
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞 
Vero 76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細(xì)胞、HM細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞 
H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞 
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞 
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞 
DSL-6A-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTh 74細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞、HMEC細(xì)胞 
SUDHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞 
RFL-6 大鼠成纖維細(xì)胞系
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞 
SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞、Ly7細(xì)胞 
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞 
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞 
NCIH1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細(xì)胞、H498細(xì)胞、H-847細(xì)胞 
HuT78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞 
HBVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞 
HTh74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1568細(xì)胞、KG1A細(xì)胞、KY-50細(xì)胞 
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞 
NPC-TW039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞、NB-9細(xì)胞 
HuH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H747細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞 
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞 
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