"UK Pan-1 人胰腺導(dǎo)管上皮癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞，可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進行細(xì)胞傳代。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代，部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，步驟７-９不做。直接將細(xì)胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
UK Pan-1 人胰腺導(dǎo)管上皮癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當(dāng)溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當(dāng)溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細(xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分 
UK Pan-1 人胰腺導(dǎo)管上皮癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞 
Mel526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-MS細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞 
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞 
GM03671C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-28細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞 
SUNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞 
Mono Mac 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP-10細(xì)胞、KE 37細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞 
SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞 
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞 
Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞 
Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞 
PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞 
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞 
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞 
HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞 
TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞 
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞 
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞 
ID8/MOSEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP1細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞 
Normal Rat Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526 mel細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞 
Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞 
UK Pan-1 人胰腺導(dǎo)管上皮癌細(xì)胞系
NCI-H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL28細(xì)胞、L1210細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞 
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞 
HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICCF細(xì)胞、5637細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞 
NCI-H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82細(xì)胞、CPAE細(xì)胞、A-427細(xì)胞 
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞 
AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞 
Tu177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞、HPDE細(xì)胞 
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞 
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞 
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞 
KRCY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK-II細(xì)胞、Ly18細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞 
DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞 
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞 
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞 
NCI-H187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞 
HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞 
HCC-9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNGHOS細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞 
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞 
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞 
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞 
BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO K1細(xì)胞、SF17細(xì)胞、NCTC 1469細(xì)胞 
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞 
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞 
Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞 
FC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac1細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、AM38細(xì)胞 
207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOS細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞 
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞 
IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞 
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞 
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞 
SK_N_FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC1細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞、HMC-1細(xì)胞 
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞 
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞 
MC/CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細(xì)胞、A 72細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞 
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞 
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞 
SkMel31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R-V1細(xì)胞、LS-174細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞 
RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞 
3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞 
746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞 
CAL-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞 
UK Pan-1 人胰腺導(dǎo)管上皮癌細(xì)胞系
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞、C 643細(xì)胞 
WM-2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mahlavu細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞 
WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞 
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞 
J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞 
293c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細(xì)胞、UO31細(xì)胞、BC-023細(xì)胞 
GM02131A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞 
MKN-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H820細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞 
WI38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細(xì)胞、WC00059細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞 
LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細(xì)胞、PC10細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞 
H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、Ca759細(xì)胞 
KYSE-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95-D細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、K1735細(xì)胞 
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