"MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系，公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù)，為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學研究中最基礎、也是最常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗，在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護，小心培養(yǎng)，心里都是默默承諾：我要護你一世周全！可是可是……無數(shù)次細胞都因污染而離我而去，投入的不只是我們貌美如花的青春，還有那一去不復返的經(jīng)費！在細胞生物學，生物化學，免疫學，神經(jīng)生物學，病理學……只要涉及細胞的研究領域，都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中，也就屬支原體最狡猾了，他最善于隱藏自己，因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡，但會改變細胞的新陳代謝，甚至會改變細胞的基因表達譜，我們就這樣被欺騙了無數(shù)次，誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了?？墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗中總結(jié)出來，當你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時：生長速率改變；活性減弱；形態(tài)改變；染色體畸變；轉(zhuǎn)染效率顯著降低；細胞復蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了，也許你的細胞已經(jīng)被支原體欺凌了！ 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
GC-2細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞 
RWPE2細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞 
WM-2664細胞系相關產(chǎn)品：Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞 
LC-1-sq細胞系相關產(chǎn)品：RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞 
P3 NS1 Ag4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞 
A 172細胞系相關產(chǎn)品：A427細胞、BEAS2B細胞、Tissue Culture-1細胞 
SKML-28細胞系相關產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞 
JJN3細胞系相關產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞 
PC-3M細胞系相關產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞 
U266B1細胞系相關產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞 
EFM-192C細胞系相關產(chǎn)品：C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞 
SUM-190PT細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞 
X63Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞 
FC33細胞系相關產(chǎn)品：MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞 
AR4IP細胞系相關產(chǎn)品：D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞 
SU-DHL6細胞系相關產(chǎn)品：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞 
A704細胞系相關產(chǎn)品：VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞 
CA-46細胞系相關產(chǎn)品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞 
UMNSAH/DF-1細胞系相關產(chǎn)品：NCM-460細胞、NCIH1666細胞、H-1993細胞 
HL1細胞系相關產(chǎn)品：EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞 
MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細胞系
H2330細胞系相關產(chǎn)品：MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞 
MRASMC細胞系相關產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、EC9706細胞、CCD-18Co細胞 
BRL細胞系相關產(chǎn)品：HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞 
SUM-159細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞 
LM6細胞系相關產(chǎn)品：NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞 
SUPB15細胞系相關產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞 
GB-1細胞系相關產(chǎn)品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞 
JeKo 1細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞 
MBVP細胞系相關產(chǎn)品：COLO-16細胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、SK-N-DZ細胞 
TE 32細胞系相關產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞 
CW2細胞系相關產(chǎn)品：Epstein-Barr-2細胞、MJ細胞、HS 683T細胞 
KLM1細胞系相關產(chǎn)品：EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞 
Hs 729.T細胞系相關產(chǎn)品：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞 
TK-1細胞系相關產(chǎn)品：TM3細胞、PC-3M細胞、GLC-15細胞 
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞 
NOR10細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞 
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品：BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞 
C3H10T1/2CL8細胞系相關產(chǎn)品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞 
Human ErythroLeukemia細胞系相關產(chǎn)品：EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞 
UPCI:SCC090細胞系相關產(chǎn)品：alpha-TC1.6細胞、HP615細胞、EFM-19細胞 
VMM5細胞系相關產(chǎn)品：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞 
Hs.27細胞系相關產(chǎn)品：H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞 
CAKI 1細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞 
SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞 
NCI-HUT-69細胞系相關產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞 
NCIH1770細胞系相關產(chǎn)品：J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞 
Hs 636 T細胞系相關產(chǎn)品：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞 
HTori3細胞系相關產(chǎn)品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞 
SCC7細胞系相關產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞 
ML2細胞系相關產(chǎn)品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞 
HCCLM3細胞系相關產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞 
C2A細胞系相關產(chǎn)品：HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞 
U-343 MG細胞系相關產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞 
Walker256細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞 
OCI-Ly8細胞系相關產(chǎn)品：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞 
YD-38細胞系相關產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞 
ACHN細胞系相關產(chǎn)品：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞 
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞 
OC-316細胞系相關產(chǎn)品：ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞 
Mono-Mac-1細胞系相關產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞 
TFK1細胞系相關產(chǎn)品：ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞 
MC3T3-E1 Subclone 4 小鼠原成骨細胞系
RMS 13細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞 
LS-411N細胞系相關產(chǎn)品：N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞 
CCD 841 CoN細胞系相關產(chǎn)品：SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞 
MSTO-211H細胞系相關產(chǎn)品：H-748細胞、Bx-PC3細胞、ECGI10細胞 
SHEP1細胞系相關產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞 
D-341Med細胞系相關產(chǎn)品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞 
UMR-106細胞系相關產(chǎn)品：NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞 
TGW細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞 
MLMA細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞 
Anip[973]細胞系相關產(chǎn)品：B16BL6細胞、PNT-1A細胞、GTL16細胞 
MS1細胞系相關產(chǎn)品：H1522細胞、GM05372E細胞、PTK 2細胞 
WM-2664細胞系相關產(chǎn)品：Mahlavu細胞、PAI細胞、GM00215A細胞 
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