"CL-40 人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無(wú)菌意識(shí)要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面，并開(kāi)啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以７０%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置，其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無(wú)菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時(shí)，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多，且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源 
CL-40 人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
貼壁細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備事項(xiàng)：將15mL離心管、T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶、PBS緩沖液、移液管、電動(dòng)移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細(xì)胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用。貼壁細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)步驟：將準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基等物品用酒精消毒后放入安全柜中；從培養(yǎng)箱中取出待處理的細(xì)胞，在顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)；用酒精消毒培養(yǎng)瓶，放入安全柜中；輕輕吸去細(xì)胞上清；加入2~3ml(PBS緩沖液)潤(rùn)洗一次，吸去上清；加入1mL(0.25%胰酶-0.02%EDTA)，輕輕晃勻、覆蓋所有細(xì)胞后，置于37℃培養(yǎng)箱靜置消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；按比例將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中；在顯微鏡下觀察傳代后的細(xì)胞密度及狀態(tài)；將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。注意事項(xiàng)：培養(yǎng)過(guò)程中需維持細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，80%左右即可傳代，傳代比例請(qǐng)參照說(shuō)明書(shū)建議；消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，大部分細(xì)胞回縮變圓并有少量細(xì)胞脫落即可中止消化，難消化的細(xì)胞可分次消化，每次時(shí)間不超過(guò)5min；培養(yǎng)過(guò)程中需要定期換液，一般細(xì)胞建議2~3天換液一次。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分 
CL-40 人結(jié)腸癌細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的，尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非常考究你的功夫的！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤](méi)有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開(kāi)細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開(kāi)，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來(lái)，又不能太過(guò)，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開(kāi)。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問(wèn)題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無(wú)血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來(lái)洗，洗的效果和用無(wú)血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開(kāi)來(lái)。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開(kāi)來(lái)的時(shí)候，就可以直接吹打下來(lái)，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過(guò)了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒(méi)有胰酶了，可以選用此方法。不過(guò)一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞 
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞 
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞 
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞 
HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞 
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞 
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞 
Hs 940.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細(xì)胞、TE10細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞 
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞 
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞 
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞 
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞 
BCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞 
MCA 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞 
L 363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3B細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞、LU451細(xì)胞 
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞 
McA-RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細(xì)胞、PL-45細(xì)胞、Mel624細(xì)胞 
H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞 
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞 
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細(xì)胞、NE1細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞 
CL-40 人結(jié)腸癌細(xì)胞系
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞 
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞 
P388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞 
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞 
3T3NIH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞 
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞 
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞 
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞 
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞 
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞 
BEL-7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞 
LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞 
SW-1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞、SKNEP細(xì)胞 
IAR20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞 
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞 
RWPE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 643細(xì)胞、SF-539細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞 
HOC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、H-2023細(xì)胞 
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞 
Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞 
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞 
MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞 
Swiss/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞 
Ramos(RA1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞 
OCI AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞 
OVCA-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m5F細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞 
WM 239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞 
MKN74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT20細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞 
OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞 
Hs729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 08.13細(xì)胞、HONE1細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞 
SK-MEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞 
Jurkat77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、H766T細(xì)胞 
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞 
IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞 
HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞 
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞 
CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2227細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞 
NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞 
Panc327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞 
G361-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細(xì)胞、TK-1細(xì)胞、REC 1細(xì)胞 
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞 
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞 
CL-40 人結(jié)腸癌細(xì)胞系
NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞 
Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞 
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞 
Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細(xì)胞、ATC241細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞 
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞 
TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞 
NCI-H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞 
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞 
SW900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞 
HOP-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK2細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞 
ONS-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細(xì)胞、LS1034細(xì)胞、SW48細(xì)胞 
Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4 I細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞 
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