"MDA-MB-330 人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：①進(jìn)無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時(shí)間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時(shí)間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。重要細(xì)胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨(dú)立進(jìn)行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點(diǎn)是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價(jià)格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細(xì)菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價(jià)廉，熏蒸消毒時(shí)不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
細(xì)胞生長：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
MDA-MB-330 人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細(xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分 
MDA-MB-330 人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個(gè)問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。 
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書 
HBE 135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞 
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞 
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞 
Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05384細(xì)胞、Panc8.13細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞 
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞 
Huh7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞 
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞 
RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞 
rHSC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞、Panc327細(xì)胞 
NCI-H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295細(xì)胞、H1341細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞 
Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞 
PANC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC-6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞 
NCI-H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22細(xì)胞、JG細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞 
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞 
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞 
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞 
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞 
A-172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞 
SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞 
Hs578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10 RGB細(xì)胞、A427細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞 
MDA-MB-330 人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
CMT93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞 
C-8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB-985細(xì)胞、BS-C-1細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞 
OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞 
P116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞 
SUNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞 
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞 
NCIH1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細(xì)胞、Tb 1 Lu細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞 
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono Mac 6細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞、LN-229細(xì)胞 
JM-Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK-1細(xì)胞、TE85細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞 
SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞 
Ramos.2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞 
LAN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82sclc細(xì)胞、207細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞 
PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞 
HUT 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞、MEG-01細(xì)胞 
U-2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM-38細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞 
HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞 
H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞 
SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞 
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞 
PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞 
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞 
PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 982細(xì)胞、DV90細(xì)胞、C33A細(xì)胞 
CW-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2066細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞 
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞 
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞 
3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞 
ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞 
HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞 
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞 
MLMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-266細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞 
H-1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI.8226細(xì)胞、CCC-HSF-1細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞 
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞 
HPDEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO_320DM細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞 
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞 
D-283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞 
NS-20Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF CEM細(xì)胞、VK2細(xì)胞、U2932細(xì)胞 
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞 
HDMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞 
NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞 
NALM-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞 
NCIADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細(xì)胞、CEL細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞 
MDA-MB-330 人浸潤性小葉性乳腺癌細(xì)胞系
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞 
RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞 
Bovine ENDometrial cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N9細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞 
Kasumi-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1623細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞 
HT 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1-LUC細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞、PC-9細(xì)胞 
Super Tube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII/St細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞、TE5細(xì)胞 
SK-OV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-450細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞 
OCI-Ly 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞 
THLE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞 
He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細(xì)胞、H-226細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞 
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞 
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC（Human Schwann）細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞 
"