"CAL-12T 人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞，可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代，部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風機清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟７-９不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
CAL-12T 人肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
CAL-12T 人肺癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞 
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞 
RCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞 
HUCCT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞 
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞 
TM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174細胞、3T3-A31細胞、746T細胞 
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞 
SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞 
TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞 
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞 
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞 
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞 
DR2R1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞 
Duck embryo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞 
OSC-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞 
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞 
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞 
NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞 
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞 
HCT-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞 
CAL-12T 人肺癌細胞系
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞 
PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞 
C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞 
3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞 
LNCaP-C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6細胞、QGY細胞、HT29細胞 
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞 
3T3-A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞 
HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞 
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞 
NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞 
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞 
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞 
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞 
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞 
OSKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞 
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞 
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞 
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞 
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞 
LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞 
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞 
U266 Bl細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1651細胞、TM4細胞、SU.86.86細胞 
Hs281T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞 
Loucy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞 
HuNS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞 
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞 
H4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M1細胞、RPMI-2650細胞、SNU761細胞 
RKOE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞 
KP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞 
TMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞 
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞 
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞 
697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞 
Fu97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞 
LA-N-6(OAN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞 
TGW-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞 
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞 
MDA 435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP2細胞、A-375.S2細胞、T47D細胞 
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞 
SUDHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98-G細胞、NEC-8細胞、KP 4細胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞 
CAL-12T 人肺癌細胞系
Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞 
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞 
CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞 
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞 
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞 
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞 
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞 
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞 
MDA MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞 
HCC-2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE-1細胞、SK-MEL 28細胞、746T細胞 
NCI-H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL28細胞、HIT細胞、COLO824細胞 
RCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細胞、DanG細胞、COLO829細胞 
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