"Pt K1 袋鼠腎細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，的優(yōu)點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
Pt K1 袋鼠腎細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分 
Pt K1 袋鼠腎細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
RPMI 7951細胞系相關產(chǎn)品：X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞 
GC1-SPG細胞系相關產(chǎn)品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞 
WPE-int細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞 
Human Embryonic Skin細胞系相關產(chǎn)品：BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞 
NUGC-4細胞系相關產(chǎn)品：WSU-DLCL-2細胞、CF-1 MEF細胞、Be-Wo細胞 
NCI-H2073細胞系相關產(chǎn)品：Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞 
OCI Ly1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞 
MC 116細胞系相關產(chǎn)品：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞 
D-341Med細胞系相關產(chǎn)品：MT2細胞、hTERT-HPNE細胞、RPMI #8226細胞 
MDAMB435S細胞系相關產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞 
HCC1419細胞系相關產(chǎn)品：Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞 
PLC8024細胞系相關產(chǎn)品：LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞 
VB細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞 
QBI-HEK 293A細胞系相關產(chǎn)品：EU-2細胞、MN9D細胞、CHAGOK1細胞 
Cattle chondrocytes細胞系相關產(chǎn)品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞 
KM-12細胞系相關產(chǎn)品：T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞 
KM-12細胞系相關產(chǎn)品：T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞 
H2405細胞系相關產(chǎn)品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞 
HSC-3細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2081細胞、Nb2細胞、HUCEC細胞 
Tu212細胞系相關產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞 
Pt K1 袋鼠腎細胞系
TCC-PAN2細胞系相關產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細胞、LMH細胞、IOSE-Van細胞 
AU-565細胞系相關產(chǎn)品：LCLC-103H細胞、Clone 166細胞、Panc04.03細胞 
HSCT6細胞系相關產(chǎn)品：LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞 
MDAMB361細胞系相關產(chǎn)品：HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞 
A204細胞系相關產(chǎn)品：HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞 
X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞 
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞 
NCI-H2029細胞系相關產(chǎn)品：Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞 
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關產(chǎn)品：SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞 
H-520細胞系相關產(chǎn)品：QGP-1細胞、UPCI-SCC090細胞、CPAE細胞 
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞 
Okayama University Medical School-23細胞系相關產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞 
MCF7/WT細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞 
HSAS3細胞系相關產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞 
OCI/AML4細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞 
16-HBE14o細胞系相關產(chǎn)品：SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞 
SF295細胞系相關產(chǎn)品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞 
LU165細胞系相關產(chǎn)品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞 
MSB-1細胞系相關產(chǎn)品：WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞 
HPDLF細胞系相關產(chǎn)品：HCC2935細胞、MLO-Y4細胞、J774 A.1細胞 
H508細胞系相關產(chǎn)品：ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞 
LAN-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞 
WSUDLCL2細胞系相關產(chǎn)品：CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞 
LMTK-細胞系相關產(chǎn)品：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞 
NIH:OVCAR-8細胞系相關產(chǎn)品：X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞 
CHP100細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞 
G-292細胞系相關產(chǎn)品：U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞 
CCD-33Co細胞系相關產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞 
SUDHL-2細胞系相關產(chǎn)品：LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞 
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞 
H2052細胞系相關產(chǎn)品：K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞 
GM03320D細胞系相關產(chǎn)品：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞 
HT 1080細胞系相關產(chǎn)品：KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞 
RBL-I細胞系相關產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞 
HuT-78細胞系相關產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞 
U-251 MG細胞系相關產(chǎn)品：AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞 
NCI-SNU-475細胞系相關產(chǎn)品：PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞 
EOC-20細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞 
NUGC3細胞系相關產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞 
NCIH2228細胞系相關產(chǎn)品：KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞 
SW-780細胞系相關產(chǎn)品：U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞 
Pt K1 袋鼠腎細胞系
CCC-HSF-1細胞系相關產(chǎn)品：McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞 
Vx2細胞系相關產(chǎn)品：697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞 
H-378細胞系相關產(chǎn)品：SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞 
IHH細胞系相關產(chǎn)品：HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞 
SW-1353細胞系相關產(chǎn)品：AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞 
MDA MB 361細胞系相關產(chǎn)品：H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞 
MDA-MB453細胞系相關產(chǎn)品：CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞 
JVM3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞 
UACC-893細胞系相關產(chǎn)品：HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞 
STO細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1092細胞、E304細胞、ACC3細胞 
SUM102細胞系相關產(chǎn)品：CPAE細胞、UPCI-SCC090細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞 
WPE-int細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2108細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、U118MG細胞 
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