"MUVEC 小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞系
細胞背景資料：臍靜脈；內(nèi)皮細胞 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
MUVEC 小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
MUVEC 小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
H69/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞 
OV-2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞 
PANC 1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞 
hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞 
SCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞 
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞 
RPMI no. 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞 
SKMEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞 
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞 
NIH-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞 
HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞 
U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞 
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞 
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞 
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞 
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞 
BIC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞 
NCI-H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞 
MUVEC 小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞系
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞 
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞 
MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞 
NCIH510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞 
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞 
LICR-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞 
Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞 
JHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞 
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞 
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞 
UPCI:SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞 
HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞 
OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞 
Co-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細胞、HCT-FET細胞、MDAMB415細胞 
COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞 
UPCI-SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞 
LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞 
MDA-MB-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞 
TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞 
Centre Antoine Lacassagne-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-548細胞、LNT-229細胞、NTERA2-cloneD1細胞 
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞 
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞 
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞 
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞 
PK (15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞 
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞 
QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞 
BEL 7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞 
H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞 
NMCG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞 
CHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞 
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞 
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞 
LICCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-3細胞、DB細胞、EJ1細胞 
WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞 
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞 
CV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞 
Ku812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159PT細胞、GC-2細胞、CD-18細胞 
EB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細胞、CTLA4 Ig-24細胞、SUD6細胞 
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞 
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞 
MUVEC 小鼠臍靜脈內(nèi)皮細胞系
SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞 
HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞 
Panc-813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞 
OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞 
HuT78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞 
MGH-U3 (RN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞 
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞 
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞 
H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞 
KCL22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細胞、Mo7e細胞、NCI-H1105細胞 
HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SP-2/0-AG14細胞、95D細胞、MDA-MB468細胞 
PANC 1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEP2D細胞、TCCPAN2細胞、CCC-HEL-1細胞 
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