"L-WRN 小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
細胞背景資料：皮下結(jié)締組織；自發(fā)永生；雄性；C３H/An 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
L-WRN 小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
L-WRN 小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞 
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞 
HEK;293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞 
MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞 
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞 
BJA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3Ag1.2.3細胞、NE-1細胞、BC-020細胞 
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞 
Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞 
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞 
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞 
CT-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Immortal Pig Intestinal-2I細胞、Hs-606-T細胞、A2780/Taxol細胞 
PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞 
BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞 
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞 
J774 A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞 
639 V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞 
639 V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細胞、V-79-4細胞、FCCH1024細胞 
HGE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞 
NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞 
RBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-C4-2細胞、MDA MB231細胞、HFT 8810細胞 
L-WRN 小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
HOP 92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞 
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞 
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞 
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞 
Hs-675-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞 
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞 
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞 
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞 
U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞 
NCI-H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞 
CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞 
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞 
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞 
MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞 
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞 
KRC Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L540細胞、B-95-8細胞、McG-1細胞 
Kit-225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞 
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞 
SL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞 
RL95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞 
HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞 
P31-FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞 
PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞 
GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞 
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞 
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞 
PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞 
NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞 
HEK 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細胞、HBE細胞、IAR 20細胞 
MDAMB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞 
P3-x63-Ag8 653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞 
CCRF-SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM 1細胞、NS1-1 Ag4.1細胞、C12細胞 
CL1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞 
AE1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞 
PC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞 
P815細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞 
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞 
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞 
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞 
L-WRN 小鼠皮下結(jié)締組織細胞系
HEI193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞 
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞 
SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞 
ARO-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT-26細胞、RCC4細胞、SK-N-BE(1)細胞 
TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞 
VM-CUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞 
QGP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞 
McCoy B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞 
HPBALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞 
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BT 325細胞、NCI-H2330細胞 
KMY1022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細胞、118MG細胞、RT-112細胞 
HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K 562細胞、CFPAC-1細胞、RD-ES細胞 
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