9L cell line大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系

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產(chǎn)品詳情

中文名稱:9L cell line大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系	英文名稱:9L cell line
保存條件: 低溫避光	純度規(guī)格: 1x10(6)viable cells/ml
產(chǎn)品類別: 有機(jī)化學(xué)品

"9L cell line大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：膠質(zhì)瘤；Fischer ３４４

細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題：可以這樣說，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

9L cell line大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系

細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！

9L cell line大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系

細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書

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SU 86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細(xì)胞、HEK-293 c18細(xì)胞、Hs840_T細(xì)胞

Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞

MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞

2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞

MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞

HAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、A-72細(xì)胞、DU4475細(xì)胞

H-2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433_Bast細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞

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關(guān)鍵字： 9L cell line大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞系;

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上海賓穗生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū)，擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì)，提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品，產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念，致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢(shì)市場(chǎng)資源，以匠心服務(wù)廣大客戶，我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國(guó)內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品，充分滿足客戶的試劑需求。

成立日期	2018-01-10 （8年）	注冊(cè)資本	635萬元人民幣
員工人數(shù)	50-100人	年?duì)I業(yè)額	￥ 500萬-1000萬
主營(yíng)行業(yè)	通用試劑,高純?cè)噭?催化試劑,基礎(chǔ)無機(jī)試劑	經(jīng)營(yíng)模式	工廠,服務(wù)

上海賓穗生物科技有限公司

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公司成立：8年
注冊(cè)資本：635萬元人民幣
企業(yè)類型：有限責(zé)任公司(自然人投資或控股)
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