"KYSE-140 人食管鱗癌細胞系
細胞背景資料：食管鱗癌細胞；男性 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
KYSE-140 人食管鱗癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞建議只吹打，不消化）其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意，結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。 
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁 
KYSE-140 人食管鱗癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結：懸浮性細胞應如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內應有多少細胞濃度？冷凍管內細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應如何處理？直接滅菌后丟棄之。 
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書 
NCI N87細胞系相關產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞 
NH-6細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞 
KYSE-70細胞系相關產(chǎn)品：HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞 
H1105細胞系相關產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞 
BC3 H1細胞系相關產(chǎn)品：Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞 
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞 
OVSAHO細胞系相關產(chǎn)品：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞 
hs 68細胞系相關產(chǎn)品：MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞 
OCI-AML-2細胞系相關產(chǎn)品：PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞 
NCIH1092細胞系相關產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞 
H-1437細胞系相關產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞 
OCI-AML3細胞系相關產(chǎn)品：HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞 
RDES細胞系相關產(chǎn)品：RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞 
8505C細胞系相關產(chǎn)品：BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞 
OVCA5細胞系相關產(chǎn)品：PANC-10-05細胞、ML2細胞、MDA-MB-134-VI細胞 
WEHI 164細胞系相關產(chǎn)品：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞 
WEHI 164細胞系相關產(chǎn)品：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞 
NRK52E細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞 
Colo699細胞系相關產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞 
SNU-16細胞系相關產(chǎn)品：2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞 
KYSE-140 人食管鱗癌細胞系
MEG01細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞 
MES 23.5細胞系相關產(chǎn)品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞 
Tissue Culture-1細胞系相關產(chǎn)品：CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞 
PaTu 8988s細胞系相關產(chǎn)品：22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞 
NCI/ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品：FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞 
SUIT 2細胞系相關產(chǎn)品：K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞 
MKN28細胞系相關產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞 
NOMO-1細胞系相關產(chǎn)品：786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞 
KP-N-RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞 
NCIH1435細胞系相關產(chǎn)品：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞 
NCI-UMC-11細胞系相關產(chǎn)品：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞 
BrCL15細胞系相關產(chǎn)品：Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞 
FF-WT-BJ細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞 
NCI-H23細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞 
UCLA SO M14細胞系相關產(chǎn)品：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞 
X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞 
KMS-11細胞系相關產(chǎn)品：NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞 
Roswell Park Memorial Institute 6666細胞系相關產(chǎn)品：BC-019細胞、UM2細胞、LU-65M細胞 
AG06814-J細胞系相關產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞 
RMC細胞系相關產(chǎn)品：NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞 
SDBMSC細胞系相關產(chǎn)品：hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞 
EHEB細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞 
MCF-10A細胞系相關產(chǎn)品：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞 
130 T細胞系相關產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞 
NeHepLxHT細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞 
32D/cl3細胞系相關產(chǎn)品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞 
hCMEC/D3細胞系相關產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞 
Panc05.04細胞系相關產(chǎn)品：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞 
Panc_08_13細胞系相關產(chǎn)品：CCD-112CoN細胞、Jurkat 77細胞、PCI-4M細胞 
HG2855細胞系相關產(chǎn)品：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞 
UCLA RO-81A-1細胞系相關產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、Hep3B細胞、M14-MEL細胞 
REC細胞系相關產(chǎn)品：JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞 
KU-812細胞系相關產(chǎn)品：PC14細胞、2008細胞、NKT細胞 
Tn 5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞 
NCI747細胞系相關產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞 
Nb2a細胞系相關產(chǎn)品：CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞 
NUGC2細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞 
P1-Raji細胞系相關產(chǎn)品：RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞 
CHG5細胞系相關產(chǎn)品：BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞 
HCS2/8細胞系相關產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞 
NCI-SNU-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞 
KYSE-140 人食管鱗癌細胞系
RBL.2H3細胞系相關產(chǎn)品：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞 
TKB1細胞系相關產(chǎn)品：Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞 
KY180細胞系相關產(chǎn)品：SW1353細胞、SW 1088細胞、RKO-E6細胞 
RPMI 1846細胞系相關產(chǎn)品：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞 
CEM/C1細胞系相關產(chǎn)品：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞 
ZYM-SVEC01細胞系相關產(chǎn)品：EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞 
H1734細胞系相關產(chǎn)品：H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞 
MDA-MB-330細胞系相關產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞 
DLD-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞 
JVM-2細胞系相關產(chǎn)品：3T3-L1 ad細胞、GM04678細胞、HS-683細胞 
RPMI.8226細胞系相關產(chǎn)品：NCIH250細胞、RTE細胞、GM02131細胞 
KYSE520細胞系相關產(chǎn)品：TE-85細胞、CMT64細胞、HPDE細胞 
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