"CW-2 人結腸癌細胞系
細胞背景資料：來源于結腸癌。 CEA陽性，移植于裸鼠可成瘤。 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
CW-2 人結腸癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。 
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 
細胞生長特性：貼壁生長 
CW-2 人結腸癌細胞系
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。 
細胞形態(tài)特性：上皮細胞 
MKN-1細胞系相關產(chǎn)品：SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞 
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關產(chǎn)品：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞 
NCI-841細胞系相關產(chǎn)品：AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞 
NCI-H2023細胞系相關產(chǎn)品：G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞 
hEM15A細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞 
HNSC細胞系相關產(chǎn)品：HCASMC細胞、MDAMB435S細胞、HEL細胞 
OCI-AML-5細胞系相關產(chǎn)品：SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞 
KM-H2細胞系相關產(chǎn)品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞 
EBC-1細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞 
HPDEC細胞系相關產(chǎn)品：COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞 
H-292細胞系相關產(chǎn)品：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞 
McA-RH 7777細胞系相關產(chǎn)品：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞 
H-1417細胞系相關產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞 
HCA 7細胞系相關產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞 
HS852.T細胞系相關產(chǎn)品：HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞 
T/GHA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞 
H-865細胞系相關產(chǎn)品：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞 
B16 melanoma細胞系相關產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞 
COLO 16細胞系相關產(chǎn)品：EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞 
FL62891細胞系相關產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞 
CW-2 人結腸癌細胞系
LLC-PK1細胞系相關產(chǎn)品：TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞 
32D clone3細胞系相關產(chǎn)品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞 
NCI-H1522細胞系相關產(chǎn)品：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞 
KMB 17細胞系相關產(chǎn)品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞 
GTL-16細胞系相關產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞 
P3HR1-BL細胞系相關產(chǎn)品：Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞 
NKL細胞系相關產(chǎn)品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞、C4-2 B細胞、SW 1222細胞 
HLEpiC細胞系相關產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞 
OK-WT細胞系相關產(chǎn)品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞 
BSC40細胞系相關產(chǎn)品：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞 
TFH細胞系相關產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞 
MRCV細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞 
UO31細胞系相關產(chǎn)品：MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞 
X63Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞 
H23細胞系相關產(chǎn)品：EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞 
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞 
HBVP細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞 
Hs 821.T細胞系相關產(chǎn)品：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞 
THP-1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞 
H-2009細胞系相關產(chǎn)品：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞 
D341Med細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞 
JF305細胞系相關產(chǎn)品：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞 
B16 F10細胞系相關產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞 
PLC細胞系相關產(chǎn)品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞 
MN9D細胞系相關產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞 
OCI/AML-5細胞系相關產(chǎn)品：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞 
NE1-E6E7細胞系相關產(chǎn)品：SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞 
Huh-7細胞系相關產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞 
C-33 A細胞系相關產(chǎn)品：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞 
SUM-190細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞 
HEK-293FT細胞系相關產(chǎn)品：B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞 
MLE12細胞系相關產(chǎn)品：KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞 
SU-DH-L5細胞系相關產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞 
451Lu細胞系相關產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞 
MDA-MB-134 VI細胞系相關產(chǎn)品：G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞 
RMG-I細胞系相關產(chǎn)品：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞 
SaOS細胞系相關產(chǎn)品：EA.Hy926細胞、RPMI #8226細胞、CWR22R-V1細胞 
OV-2008細胞系相關產(chǎn)品：IPAM-WT細胞、MHCCLM3細胞、R1610細胞 
CCD1095Sk細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞 
NU-GC-3細胞系相關產(chǎn)品：MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞 
HREC細胞系相關產(chǎn)品：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞 
CW-2 人結腸癌細胞系
293F細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞 
SW-403細胞系相關產(chǎn)品：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞 
A-2780細胞系相關產(chǎn)品：H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞 
Reh細胞系相關產(chǎn)品：CA922細胞、BT-474細胞、FHs74 Int細胞 
PC-3M-2B4細胞系相關產(chǎn)品：GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞 
HOP 92細胞系相關產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞 
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關產(chǎn)品：HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞 
TSCC1細胞系相關產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞 
NCIH1417細胞系相關產(chǎn)品：SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞 
SUM 102細胞系相關產(chǎn)品：Swiss-3T3細胞、H647ell細胞、RPMI8226細胞 
A2058細胞系相關產(chǎn)品：SW-480細胞、LA-N-1細胞、OCI-Ly 3細胞 
NCI-841細胞系相關產(chǎn)品：AML-2細胞、Hs 600.T細胞、huH 1細胞 
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