"L6 大鼠骨骼肌成肌細胞系
細胞背景資料：該細胞是Yaffe在甲基膽蒽存在的情況下從大鼠大腿肌原代培養(yǎng)的最初兩代細胞中分離得到的；在培養(yǎng)基中融合形成多核的肌管和橫紋肌纖維，細胞融合的程度隨著代數(shù)的增加而下降，因此細胞應(yīng)低代次冷凍并周期性地重新克隆以選擇融合能力強的細胞。鼠痘病毒陰性。該細胞應(yīng)在達匯合狀態(tài)前傳代，以延緩細胞分化能力的喪失。 
細胞形態(tài)：上皮細胞樣 
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應(yīng)的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導(dǎo)致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復(fù)蘇的步驟操作即可。 
細胞生長：貼壁 
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。 
細胞傳代方法：１：２傳代 
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 
細胞生長特性：貼壁生長 
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞系
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。 
細胞形態(tài)特性：成肌細胞樣 
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞 
COLO 684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞 
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞 
NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞 
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞 
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞 
DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞 
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞 
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞 
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞 
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞 
343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞 
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞 
Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞 
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞 
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞 
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞 
NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞 
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞 
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞 
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞系
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞 
RT4P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2細胞、DMS153細胞、FRhK-4細胞 
HOP62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-RC-2細胞、SK-OV-3細胞、Ku812F細胞 
HcerEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞 
D-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8細胞、138 MG細胞、SNU1040細胞 
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞 
HLE-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞 
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞 
Hs822T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL6細胞、HR-1細胞、HLE細胞 
MARC 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞 
NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞 
Ca Ski細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞 
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞 
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞 
H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞 
EC9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞 
HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞 
PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞 
MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞 
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞 
PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞 
SVG p12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞 
GC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞 
Mono Mac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞 
Hela-mock細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞 
PC3-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞 
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞 
SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞 
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞 
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞 
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞 
BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞 
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞 
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞 
FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞 
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞 
CAL-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞 
U-251_MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞 
SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞 
AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞 
NCIH1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞 
L6 大鼠骨骼肌成肌細胞系
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞 
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞 
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞 
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞 
Hep-G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞 
HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞 
MIN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞 
H-1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞 
NCIH1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324 Med細胞、GM04154B細胞、NCIH82細胞 
U 266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-4細胞、H322T細胞、CO115細胞 
OCI-LY-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細胞、H-510細胞、OCI-Ly 19細胞 
OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL261細胞、SUM 52細胞、FU-MMT-1細胞 
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