"TM4 小鼠睪丸細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞在FSH的作用下cAMP產(chǎn)量增加，但對(duì)LH無反應(yīng)；與原代Sertoli細(xì)胞相比，該細(xì)胞對(duì)FSH的反應(yīng)性降低。據(jù)報(bào)道，該細(xì)胞組成性纖溶酶原激活物的產(chǎn)量很低，但可被FSH刺激產(chǎn)生，受維刺激可有大幅增高。該細(xì)胞可產(chǎn)生視黃醇結(jié)合蛋白、組織纖溶酶原激活物和轉(zhuǎn)鐵蛋白；表達(dá)FSH受體、雄激素受體和孕激素受體。鼠痘病毒陰性。 
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣 
細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。 
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁 
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源 
TM4 小鼠睪丸細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支) 
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。 
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：６傳代；每周２-３次。 
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng) 
TM4 小鼠睪丸細(xì)胞系
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。 
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣 
MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細(xì)胞、NCI-HUT-596細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞 
HOS(TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAVSMC細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞 
HEK293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343-MG細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞 
Th17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN-6細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞 
VB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H526細(xì)胞、H-2452細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞 
Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細(xì)胞、T47-D細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞 
Karpas-422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細(xì)胞、T.T細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞 
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞 
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞 
SNU739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-PAC1細(xì)胞、149 PT細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞 
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞 
HCC2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNCL2細(xì)胞、MXI細(xì)胞、SW1783細(xì)胞 
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞 
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞 
D-283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP69細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞 
HBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 832(C).T細(xì)胞、SW1222細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞 
HBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 832(C).T細(xì)胞、SW1222細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞 
H.Ep.-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-886細(xì)胞、PLA802細(xì)胞、BT-B細(xì)胞 
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞 
U-373MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞 
TM4 小鼠睪丸細(xì)胞系
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞 
SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞 
RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞 
JROECL 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞 
451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞 
NCI-HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞、C33細(xì)胞 
VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞 
HPAF/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞 
MDA-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞 
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞 
MDA330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞 
MZ-CRC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞 
HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞 
Reuber H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：STO細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞、PL 5細(xì)胞 
LAN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH460細(xì)胞、KMM1細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞 
NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞 
Panc 3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞 
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞 
AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞 
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞 
SUM-159-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、SW1271細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞 
NCI-H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H735細(xì)胞、PL 45細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞 
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞 
SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞 
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞 
HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞 
MDA-MB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞 
NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞 
OVCA 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞、H-1944細(xì)胞 
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞 
NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞 
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞 
NTERA2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11TKB細(xì)胞、H378細(xì)胞、BT-549細(xì)胞 
SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞 
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞 
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細(xì)胞、HEC-251細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞 
EA.Hy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1770細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞、P36細(xì)胞 
RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞 
RK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2405細(xì)胞、HNE3細(xì)胞、SNU601細(xì)胞 
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞 
NG 108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞、A431細(xì)胞 
TM4 小鼠睪丸細(xì)胞系
SPDC-CCL141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HEH-2細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞 
KU-812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEM細(xì)胞、Mevo細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞 
H-820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M IE8細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞 
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞 
SuDHL 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH 82細(xì)胞、Ly7細(xì)胞、H378細(xì)胞 
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞 
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞 
293AD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH-1細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞 
LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞 
STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY 7701細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、KE39細(xì)胞 
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞 
HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、H1341細(xì)胞 
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