"CEM-T4 Thawing人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞背景資料：急性T淋巴細胞白血病；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
CEM-T4 Thawing人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞生長：懸浮
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?！緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液，計數(shù)，使細胞密度達５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點降低，使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外；４)分裝于無菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過快能影響細胞內(nèi)水分透出，太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套，以免液氮凍傷?！緩?fù)蘇細胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時搖動，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開蓋子，用吸管將細胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達到１０／ml，在融后稀釋２０倍時，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況把握）。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CEM-T4 Thawing人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞生長特性：懸浮
細胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié)：冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂；細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時，是否應(yīng)馬上去除DMSO？除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外，絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞），在解凍之后，應(yīng)直接放入含有１０-１５ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題；可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活；培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用５%或１０%CO２？或根本沒有影響？一般培養(yǎng)基中大都使用HCO３-/CO３２-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO３的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO２濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO３含量為每公升３.７g時，細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用１０%CO２；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO３為每公升１.５g時，則應(yīng)使用５%CO２培養(yǎng)細胞。何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素？除于特殊篩選系統(tǒng)中外，一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下，培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
LY-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞
526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
RPE1-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
CO115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞
Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
BCAP37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSCT6細胞、HEK 293T/17細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS1細胞、HKF細胞、BJAB-1細胞
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
J774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D:cl3細胞、UCLA-SO-14細胞、U-138-MG細胞
MONO-MAC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
NCI-H2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、BHT101細胞、COLO-824細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
Ramos 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
H283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 Bl細胞、beta TC6細胞、Gerner 7666細胞
CEM-T4 Thawing人急性T淋巴細胞白血病細胞系
NCI-H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞
FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
Kit-225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE­8.1/2細胞
T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞
NPC-TW 039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞
H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
A2780/CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375SM細胞、SNU-16細胞、alpha TC1-6細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
U87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
HMEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞
Ramos 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞
Z310細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
Helacyton gartleri細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
RSC-364細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
U-343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細胞、H735細胞、H1385細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
FHL124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
ASH-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1703細胞、SW756細胞、NCI-H2342細胞
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
RBL 2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
RAG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
MV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
H-2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
Michigan Cancer Foundation-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-12細胞、HSC/mHSC細胞、CAL27細胞
CEM-T4 Thawing人急性T淋巴細胞白血病細胞系
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
GB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
Lewis Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI231細胞、UMNSAH/DF#1細胞、LIXC-002細胞
BC3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
NW38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
CMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞
G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞
MFE280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞
PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
UCLA RO-81A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、Hep3B細胞、M14-MEL細胞
MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞
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