"38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：B淋巴瘤；C３H/eB
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤細胞系
細胞生長：懸浮
常見培養(yǎng)細胞預防污染的有效措施：體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預防可從以下幾方面著手：１)添加抗生素：各種抗生素性質(zhì)不同，對各種微生物的作用也不同，聯(lián)合應用比單用效果好，預防性應用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性，且對細胞本身也有一定影響，因此為避免誘導抗藥細菌，應定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素，或盡可能不用抗生素處理；２)從物品、用品消毒滅菌著手：細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作：７５%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后，使用可移動的紫外燈至少消毒３０min，加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制３００ml的飽和酸銅加３L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細胞凍存注意事項：細胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細胞懸液中；不同細胞消化時間有差異，以實際鏡檢結果為準，大部分細胞回縮變圓并有少量細胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應選擇匯合度80%-90%左右，細胞處于對數(shù)生長期時進行凍存操作，確保細胞凍存時狀態(tài)，凍存密度可根據(jù)細胞特性進行調(diào)整；凍存細胞保存溫度應低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準備凍存的細胞；顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細胞凍存實驗準備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復溫至室溫，備用；程序降溫盒復溫至室溫備用。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：半貼壁
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
BEAS-2B細胞系相關產(chǎn)品：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞
E304細胞系相關產(chǎn)品：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
HL7702細胞系相關產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
WEHI 3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
UMUC1細胞系相關產(chǎn)品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
Caco 2細胞系相關產(chǎn)品：HEM-L細胞、hSCC-25細胞、FRO細胞
SKMEL1細胞系相關產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
Hs-729-T細胞系相關產(chǎn)品：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞
SCC 9細胞系相關產(chǎn)品：MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞
HLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
HEK293-F細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
FHL124細胞系相關產(chǎn)品：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
CAL 78細胞系相關產(chǎn)品：SNU-387細胞、H-1915細胞、HCC 70細胞
CHL-11細胞系相關產(chǎn)品：U373 MG細胞、MFM223細胞、MCF10A細胞
JIMT1細胞系相關產(chǎn)品：SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
HCA 7細胞系相關產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
RGC6細胞系相關產(chǎn)品：SF-295細胞、MFE 296細胞、KYSE 180細胞
H220細胞系相關產(chǎn)品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
Y-79細胞系相關產(chǎn)品：MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
LIXC-002細胞系相關產(chǎn)品：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
UWB1-289細胞系相關產(chǎn)品：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
HCM細胞系相關產(chǎn)品：HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
CHL-IU細胞系相關產(chǎn)品：KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
NOZ細胞系相關產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤細胞系
SW-1116細胞系相關產(chǎn)品：CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞
MLO-Y4細胞系相關產(chǎn)品：HELF細胞、Hs 832(C).T細胞、Jiyoye (P-2003)細胞
FTC133細胞系相關產(chǎn)品：HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
AA-Mel細胞系相關產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
BT 20細胞系相關產(chǎn)品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
HFL-I細胞系相關產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
HCC-1954BL細胞系相關產(chǎn)品：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞
SupB15W細胞系相關產(chǎn)品：SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
FDCP-1細胞系相關產(chǎn)品：M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞
TE 354.T細胞系相關產(chǎn)品：NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
TE-4細胞系相關產(chǎn)品：GOS-3細胞、Hs 675.T細胞、SNT-8細胞
Calu3細胞系相關產(chǎn)品：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
Namalwa細胞系相關產(chǎn)品：A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
C32r細胞系相關產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關產(chǎn)品：EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
NCIH2452細胞系相關產(chǎn)品：B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
SUDHL8細胞系相關產(chǎn)品：OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
SUM190PT細胞系相關產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
NHA細胞系相關產(chǎn)品：MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
KMS-18細胞系相關產(chǎn)品：MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞
SKM-1細胞系相關產(chǎn)品：HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
MiaPaCa-2細胞系相關產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
HCC 2185細胞系相關產(chǎn)品：H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
JF305細胞系相關產(chǎn)品：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
HS-766-T細胞系相關產(chǎn)品：HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞
KYSE 410細胞系相關產(chǎn)品：ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
PG-4細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
4175細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
OKAC1細胞系相關產(chǎn)品：P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞
OCI/AML-3細胞系相關產(chǎn)品：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞
C-33 A細胞系相關產(chǎn)品：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
LOU-NH-91細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
38C13 Thawing小鼠B淋巴瘤細胞系
Ca Ski細胞系相關產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
PLC細胞系相關產(chǎn)品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
BRL 3A細胞系相關產(chǎn)品：PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞
CHL1細胞系相關產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
HFF-1細胞系相關產(chǎn)品：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
TOV-21G細胞系相關產(chǎn)品：H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
RPE-1細胞系相關產(chǎn)品：Human Hepatocyte Line 5細胞、H-1793細胞、HFLS細胞
MuM-2C細胞系相關產(chǎn)品：Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
Daoy細胞系相關產(chǎn)品：KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞
VAESBJ細胞系相關產(chǎn)品：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
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