"WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：彌漫大B淋巴瘤；女性
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長：懸浮
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng)：①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材；②每天觀察細(xì)胞形態(tài)，掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn)：健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時(shí)即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象，應(yīng)立即采取措施，一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持：細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn)。對每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn)，要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序：采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1~2℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5~10℃/min；當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細(xì)胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細(xì)胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細(xì)胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml）。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中，密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng)，24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮
因?yàn)榧?xì)胞生長的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
LED-WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVOG細(xì)胞、H1404細(xì)胞、ARO-81細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
HCC-1599細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B/C3T3細(xì)胞、HBEpiC細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
NCI-H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞
L02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1651細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞、B958細(xì)胞
LK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAEC細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞、A1847細(xì)胞
NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞
TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞
NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
Hep 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞
KYSE 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞
NCI-H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、3T3細(xì)胞
HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞
OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞
KPL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-940-T細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞、MV 3細(xì)胞
NCI-H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC Sup細(xì)胞、Hs695細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
HRIF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
293-GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細(xì)胞、SKES1細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞
GM00637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0410細(xì)胞、H847細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞
Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞
ROS 17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLFa細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞
NUGC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞
H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞
TK 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-116細(xì)胞、AG06814-N細(xì)胞、CAL851細(xì)胞
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
GOS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞
JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞
FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞
KYSE520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞
UCD-MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
NCIH1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OP-9細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
OPM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92MI細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞、MSC細(xì)胞
SKMEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-134細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞、MV4II細(xì)胞
H4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞、624細(xì)胞
ECV 304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞
TYK-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞
H295R-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
HT22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞
LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞
NCI-H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細(xì)胞、NCI H295R細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞
NTC200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB15細(xì)胞、SK-ES細(xì)胞、P815細(xì)胞
RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞
UMNSAH-DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞
NCIH345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 738細(xì)胞、MT4細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞
NCI-SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞
WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞系
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞
266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671C細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞
C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞
NCTC 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02.03細(xì)胞、HPMEC細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞
L-363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞
Jurkat E6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細(xì)胞、H2291細(xì)胞、NCI522細(xì)胞
PE/CA-PJ-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-433細(xì)胞、SUM52細(xì)胞、S-16細(xì)胞
KP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細(xì)胞、PAa細(xì)胞、NRCC細(xì)胞
H-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV 1063細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞
NCI-H1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞
TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞
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