"WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細胞系
細胞背景資料：彌漫大B淋巴瘤；女性
細胞形態(tài)：淋巴母細胞樣
WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細胞系
細胞生長：懸浮
細胞傳代注意事項：①傳代培養(yǎng)時注意無菌操作并防止細胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每種細胞使用一套器材；②每天觀察細胞形態(tài)，掌握好細胞是否健康的標準：健康細胞的形態(tài)飽滿，折光性好，生長致密時即可傳代；③如發(fā)現(xiàn)細胞有污染跡象，應立即采取措施，一般應棄置污染的細胞，如果必須挽救，可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復清洗，隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素，并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細胞的建系和維持：細胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細胞種子凍存來實現(xiàn)。對每一個細胞系來說都有其自身的特點，要做好建系的維持必須記錄好細胞檔案,換液傳代和做好細胞系的管理工作。培養(yǎng)細胞的凍存及復蘇：細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-１９６℃液氮中，儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
凍存和復蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結晶就大，大結晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復蘇過程應快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑特別敏感解凍后的細胞應先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
LED-WiDr細胞系相關產(chǎn)品：SVOG細胞、H1404細胞、ARO-81細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
HCC-1599細胞系相關產(chǎn)品：B/C3T3細胞、HBEpiC細胞、Human ErythroLeukemia細胞
PC 61 5.3細胞系相關產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
C2BBe1細胞系相關產(chǎn)品：PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞
NCI-H220細胞系相關產(chǎn)品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
L02細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞
LK-2細胞系相關產(chǎn)品：RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
NCIH208細胞系相關產(chǎn)品：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
TE3A細胞系相關產(chǎn)品：U266B1細胞、HOSEpiC細胞、A172細胞
NCI-SNU-182細胞系相關產(chǎn)品：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
Hep 2細胞系相關產(chǎn)品：RA細胞、HEK 293FT細胞、HOSEpiC細胞
KYSE 180細胞系相關產(chǎn)品：H2108細胞、OVCAR-8細胞、SBC-3細胞
MCF-7/ADR細胞系相關產(chǎn)品：CAL 62細胞、TE-32細胞、NCI-SNU-601細胞
NCI-H1238細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1668細胞、BRL 3A細胞、3T3細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關產(chǎn)品：F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
OSKM-1細胞系相關產(chǎn)品：CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
KPL1細胞系相關產(chǎn)品：HS-940-T細胞、C2BBe1細胞、MV 3細胞
NCI-H1930細胞系相關產(chǎn)品：TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
T-ALL1細胞系相關產(chǎn)品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
T-ALL1細胞系相關產(chǎn)品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
High5細胞系相關產(chǎn)品：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
RPMI 1846細胞系相關產(chǎn)品：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
HRIF細胞系相關產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
GM04679細胞系相關產(chǎn)品：HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細胞系
293-GP細胞系相關產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
GM00637細胞系相關產(chǎn)品：KYSE0410細胞、H847細胞、CTSC-3細胞
Caov-3細胞系相關產(chǎn)品：BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞
ROS 17/2.8細胞系相關產(chǎn)品：HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
H747細胞系相關產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
TK 10細胞系相關產(chǎn)品：MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
MDAMB415細胞系相關產(chǎn)品：293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
GOS3細胞系相關產(chǎn)品：NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
JCA1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
FHs74 Int細胞系相關產(chǎn)品：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞
KYSE520細胞系相關產(chǎn)品：TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
UCD-MLA-144細胞系相關產(chǎn)品：SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
SEG-1細胞系相關產(chǎn)品：H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞
NKT細胞系相關產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
NCIH1876細胞系相關產(chǎn)品：OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞
H-1836細胞系相關產(chǎn)品：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
GC-1spg細胞系相關產(chǎn)品：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
OPM-2細胞系相關產(chǎn)品：NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞
SKMEL-24細胞系相關產(chǎn)品：MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞
H4-II-E細胞系相關產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞
ECV 304細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
TYK-nu細胞系相關產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
H295R-S1細胞系相關產(chǎn)品：AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
PBMC細胞系相關產(chǎn)品：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
HT22細胞系相關產(chǎn)品：Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞
LSC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞
NCI-H661細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞
NTC200細胞系相關產(chǎn)品：SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞
RGM1細胞系相關產(chǎn)品：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關產(chǎn)品：U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
NCIH345細胞系相關產(chǎn)品：COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞
NCI-SNU-520細胞系相關產(chǎn)品：SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
WILL-2 Thawing人彌漫大B淋巴瘤細胞系
HEB細胞系相關產(chǎn)品：KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
266 Bl細胞系相關產(chǎn)品：GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
C8-D1A細胞系相關產(chǎn)品：MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
NCTC 929細胞系相關產(chǎn)品：Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
L-363細胞系相關產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
Jurkat E6.1細胞系相關產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關產(chǎn)品：SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
KP2細胞系相關產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
H-1954細胞系相關產(chǎn)品：OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
NCI-H1435細胞系相關產(chǎn)品：Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
TE7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
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