"NEC8 Thawing人畸胎瘤細胞系
細胞背景資料：睪丸胚胎性癌；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NEC8 Thawing人畸胎瘤細胞系
細胞生長：貼壁
如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NEC8 Thawing人畸胎瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Calu-6細胞系相關產(chǎn)品：GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
HS-683細胞系相關產(chǎn)品：HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
NCIH2196細胞系相關產(chǎn)品：HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
ONS-76細胞系相關產(chǎn)品：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
MCF-7細胞系相關產(chǎn)品：MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞
CCD1112Sk細胞系相關產(chǎn)品：NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞
QG56細胞系相關產(chǎn)品：EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞
SW 1990細胞系相關產(chǎn)品：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
Panc_03_27細胞系相關產(chǎn)品：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
NH-6細胞系相關產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
EB1細胞系相關產(chǎn)品：Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞
Pa18C細胞系相關產(chǎn)品：HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
NEC-8細胞系相關產(chǎn)品：TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞
SUM-190PT細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-F1細胞、MT-2細胞、H-2291細胞
OLN-93細胞系相關產(chǎn)品：SRA 01/04細胞、LA 4細胞、SCC4細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關產(chǎn)品：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
DH-82細胞系相關產(chǎn)品：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
Alexander cells細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
OCI AML5細胞系相關產(chǎn)品：H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞
293細胞系相關產(chǎn)品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
HT 1080.T細胞系相關產(chǎn)品：SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
HFL-1細胞系相關產(chǎn)品：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
C1R細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞
NEC8 Thawing人畸胎瘤細胞系
COLO320HSR細胞系相關產(chǎn)品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
PCI:SG-231細胞系相關產(chǎn)品：SK-ES1細胞、Hs 27細胞、Hs 706.T細胞
OB2細胞系相關產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
Rin-M-5F細胞系相關產(chǎn)品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞
OVCA8細胞系相關產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
BXPC3細胞系相關產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
HEL-92.1.7細胞系相關產(chǎn)品：H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
MDA453細胞系相關產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
MDAMB134VI細胞系相關產(chǎn)品：R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞
SKO-007細胞系相關產(chǎn)品：HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
Hs 822.T細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
293細胞系相關產(chǎn)品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
HCC78細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關產(chǎn)品：SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
AE 1201細胞系相關產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
SUPT-1細胞系相關產(chǎn)品：RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
U-2OS細胞系相關產(chǎn)品：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
COLO 738細胞系相關產(chǎn)品：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
MS 751細胞系相關產(chǎn)品：OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
NW-MEL-38細胞系相關產(chǎn)品：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
Reuber H-35細胞系相關產(chǎn)品：STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞
SV40-MES13細胞系相關產(chǎn)品：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
Huh7.5.1細胞系相關產(chǎn)品：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
MILE SVEN1細胞系相關產(chǎn)品：3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞
SCLC-21H細胞系相關產(chǎn)品：SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
G 401細胞系相關產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
HCC-9724細胞系相關產(chǎn)品：LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞
Kit225細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞
NIE 115細胞系相關產(chǎn)品：B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
LIM 1215細胞系相關產(chǎn)品：U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞
X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
U-138-MG細胞系相關產(chǎn)品：SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
NEC8 Thawing人畸胎瘤細胞系
CEL細胞系相關產(chǎn)品：FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
SKNAS細胞系相關產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
HepaRG細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
JTC-39細胞系相關產(chǎn)品：H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
BEL 7402細胞系相關產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
PA-TU-8988S細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2286細胞、OVCA 420細胞、MDA1386細胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞
NCIH841細胞系相關產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
IEC 18細胞系相關產(chǎn)品：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
3T3-L1 ad細胞系相關產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
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