"Ej138 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:膀胱癌;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
Ej138 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Ej138 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過可視法對其進(jìn)行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
TE353.SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-3細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、BC-021細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
MOLT-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、HT 144細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞
NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞
PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-025細(xì)胞、H1930細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞
HRPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞
H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞
Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞
HCa/16A3-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEP1細(xì)胞、NT2細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞
SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
TE671/RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB-F344細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、SNU739細(xì)胞
AML12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細(xì)胞、PIG3細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞
CHP-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞
GT39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞
LO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞
Ej138 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
Nb2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞
CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞
HEC251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞
NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞
Sp2/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1623細(xì)胞、LS180細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞
MB49細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC細(xì)胞、SF-763細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞
SW1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞、L細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞
NCI-H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320HSR細(xì)胞、HHUA細(xì)胞、ST486細(xì)胞
OEC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
Tb 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞
H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM134細(xì)胞、C166細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞
WSU-DLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-95-2細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞、CEM/C1細(xì)胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞
KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞
CPA 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCASMC細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞、HEL細(xì)胞
SK-CO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞、CV 1細(xì)胞
CCC-HIE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293EBNA細(xì)胞、293 H細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞
MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
NCI-H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19-Lu細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞、Scott細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
FDCP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4P細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
WERI-Rb-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM-2細(xì)胞、RT112細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞
H-661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細(xì)胞、MKN7細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞
HPAF-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
Ej138 Thawing人膀胱癌細(xì)胞系
3T3-Swiss細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 24細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞
EC-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞
HGE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
HARA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
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