"NSC-34 Thawing鼠神經(jīng)元細胞系
細胞背景資料:神經(jīng)元
細胞形態(tài):上皮細胞樣
NSC-34 Thawing鼠神經(jīng)元細胞系
細胞生長:貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NSC-34 Thawing鼠神經(jīng)元細胞系
細胞生長特性:貼壁
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
MPP89細胞系相關產(chǎn)品:HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
KNS62細胞系相關產(chǎn)品:LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞
A2008細胞系相關產(chǎn)品:OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
H-187細胞系相關產(chǎn)品:Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞
NCI-H1436細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞
CL-40細胞系相關產(chǎn)品:HNE-3細胞、HIBEC細胞、NG108-15細胞
B16/F0細胞系相關產(chǎn)品:P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
NCIH2196細胞系相關產(chǎn)品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
H-226細胞系相關產(chǎn)品:RSC96細胞、CAL 62細胞、NCI-H28細胞
Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
NCI H69細胞系相關產(chǎn)品:SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
NCIH1755細胞系相關產(chǎn)品:FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
DAN-G細胞系相關產(chǎn)品:aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
TGHAVSMC細胞系相關產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞
GM06141細胞系相關產(chǎn)品:RBL-I細胞、LC1sq細胞、NK62a細胞
SW-48細胞系相關產(chǎn)品:COLO 16細胞、PTK 2細胞、OVMANA細胞
MDA MB 361細胞系相關產(chǎn)品:H3255_DA細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、HFF-1細胞
NCI-H2196細胞系相關產(chǎn)品:MA-104細胞、6-10B細胞、H-1915細胞
RGB細胞系相關產(chǎn)品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
PECAPJ34細胞系相關產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞
LS1034細胞系相關產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
LS1034細胞系相關產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
Monomac-1細胞系相關產(chǎn)品:H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
NIH 3T3細胞系相關產(chǎn)品:AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞
IEC6細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞
RCM1細胞系相關產(chǎn)品:J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
NSC-34 Thawing鼠神經(jīng)元細胞系
Hs940T細胞系相關產(chǎn)品:A549/ATCC細胞、OCI AML5細胞、SGC-996細胞
EOC-20細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
OLN-93細胞系相關產(chǎn)品:SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
AMC-HN8細胞系相關產(chǎn)品:Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
GM 637細胞系相關產(chǎn)品:TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞
BE2C細胞系相關產(chǎn)品:H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
J 111細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
Kupffer細胞系相關產(chǎn)品:Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞
TCMK1細胞系相關產(chǎn)品:CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
SK_HEP1細胞系相關產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
OCI-Ly 1細胞系相關產(chǎn)品:TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞
RCC_7860細胞系相關產(chǎn)品:U-2 OS細胞、IOSE80UBC細胞、OLN93細胞
UMNSAH-DF 1細胞系相關產(chǎn)品:EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞
Lec1細胞系相關產(chǎn)品:ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
Calu-3細胞系相關產(chǎn)品:H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
Anip-973細胞系相關產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
SIRC細胞系相關產(chǎn)品:YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
KBM-7細胞系相關產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
AC29細胞系相關產(chǎn)品:HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞
BLO11細胞系相關產(chǎn)品:H508細胞、H522細胞、C918細胞
Anip973細胞系相關產(chǎn)品:WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
Tu-686細胞系相關產(chǎn)品:HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
H-2110細胞系相關產(chǎn)品:RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞
SKHEP-1細胞系相關產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產(chǎn)品:MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
MDA 1386細胞系相關產(chǎn)品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
H378細胞系相關產(chǎn)品:McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
Neuro2a細胞系相關產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞
SW756細胞系相關產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
H4IIEC3細胞系相關產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞
U343MG細胞系相關產(chǎn)品:JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
L-WRN細胞系相關產(chǎn)品:LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
NSC-34 Thawing鼠神經(jīng)元細胞系
H-250細胞系相關產(chǎn)品:H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
KMB-17細胞系相關產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
KMB-17細胞系相關產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
PGLH7細胞系相關產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
Mevo細胞系相關產(chǎn)品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
Rat 1細胞系相關產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞
HTR8svn細胞系相關產(chǎn)品:HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞
FK81細胞系相關產(chǎn)品:TK-10細胞、DMS53細胞、A375SM細胞
PL12細胞系相關產(chǎn)品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
Daudi細胞系相關產(chǎn)品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
KG1A細胞系相關產(chǎn)品:Colon-26細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、Anip973細胞
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