"MLTC-1 Thawing小鼠睪丸間質(zhì)細胞瘤細胞系
細胞背景資料:睪丸間質(zhì)瘤
細胞形態(tài):上皮細胞樣
MLTC-1 Thawing小鼠睪丸間質(zhì)細胞瘤細胞系
細胞生長:貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MLTC-1 Thawing小鼠睪丸間質(zhì)細胞瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)取10ml培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
TE671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
BRL3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-164細胞、NTera-2D1細胞、COLO-205細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
NCI-H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
WM35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172細胞、Hs895.T細胞、PC 12細胞
KY-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞
OCI-AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
TE14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
SF763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
MLTC-1 Thawing小鼠睪丸間質(zhì)細胞瘤細胞系
MHH-CALL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
M109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JAR細胞、RGC5細胞、Hs895.T細胞
BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
SUDHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
OCI/AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
RIN m5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
RH30SJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
RASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細胞、L428細胞、H1836細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
NCI-H165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69C細胞、MC-4細胞、HPF細胞
MNNG/HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
JAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞
HNEpC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
MLTC-1 Thawing小鼠睪丸間質(zhì)細胞瘤細胞系
NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞
HEC1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
OE-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細胞、Jurkat E6.1細胞、H250細胞
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