"RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞生長：貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
SK-MEL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞
Jurkat 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞、Kupffer細胞
HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
SK-MEL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
NCIH1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1573細胞、OCIAML5細胞、MDCC-MSB1細胞
K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞
H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
COLO 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
AN3CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細胞、4T1.2細胞、KMS11細胞
CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、PLC/PRF/5細胞、SACC-LM細胞
HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞
NCIH128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
HeLa S 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
BHT-101細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
BHT-101細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細胞、DV-90細胞、JeKo 1細胞
HOS (TE85)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
Jurkat77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
BALB 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細胞、PL45細胞、TM-3細胞
RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
HEL-92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-35 Reuber細胞、SW620細胞、H-1836細胞
Hs746-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
HCT116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞
DMS-53細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
ZR-75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞
ACT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞
HuT78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
H-920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
P30/OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
Hs 895 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP-70細胞、THP-1細胞、MLTC-1細胞
FHCRC subclone 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3細胞、OCM-1A細胞、ARO81細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細胞、UM2細胞、LU-65M細胞
H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M210B4細胞、HCFB（HCF）細胞、Hs-688A-T細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
MDA-MB-231-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞
RA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D細胞、NCIH2291細胞、MV522細胞
GM03570E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞
SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞
GP5d細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
P3HR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細胞、KYSE 450細胞、Clone 166細胞
RKO-E6 Thawing人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞系
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
GOTO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞
HCC-2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
AtT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
SW-1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞
CSQT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細胞、COR-L88細胞、BT-474細胞
SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞
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