"PK-15 Thawing豬腎細胞系
細胞背景資料：PK-１５細胞建系于１９５５（Stice,E）。是PK-１a細胞的克隆系。該細胞系可用于多種病毒的增值及特性研究。另外，電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，PK-１５細胞內有C-型病毒顆粒存在，是研究C-型病毒的材料。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
PK-15 Thawing豬腎細胞系
細胞生長：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當的完全培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
PK-15 Thawing豬腎細胞系
細胞生長特性：貼壁
冷凍細胞解凍程序：依據細胞株數據單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據細胞種類和濃度，于無菌操作臺內取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
JIMT1細胞系相關產品：SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
MDA-435細胞系相關產品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
CAL 120細胞系相關產品：CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
Human Foreskin Fibroblast細胞系相關產品：STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞
NCIH2141細胞系相關產品：Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
H1993細胞系相關產品：Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
LAC細胞系相關產品：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
MM134細胞系相關產品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
NB4細胞系相關產品：Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
NCI-HUT-596細胞系相關產品：675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞
EB-3細胞系相關產品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
SK-MEL-28細胞系相關產品：HSF細胞、AQ-Mel細胞、4-1st細胞
Hs-611-T細胞系相關產品：HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
OVCA 433細胞系相關產品：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞
Pa17C細胞系相關產品：H-345細胞、M 1細胞、OCI/AML-5細胞
L23/P細胞系相關產品：ETCC007細胞、NBL-1細胞、NB19細胞
Hs832T細胞系相關產品：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
CHOS細胞系相關產品：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
CAL-78細胞系相關產品：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
NCTC-929細胞系相關產品：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞
SK Mel 2細胞系相關產品：VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
SK Mel 2細胞系相關產品：VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
HCEpiC細胞系相關產品：C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
Colon 26細胞系相關產品：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
Psi-2-DAP細胞系相關產品：EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞
HTR8細胞系相關產品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
PK-15 Thawing豬腎細胞系
COS-7細胞系相關產品：U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞
NCI-H69細胞系相關產品：H735細胞、PL 45細胞、MHCC 97-H細胞
NCI-A549細胞系相關產品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
Mel624細胞系相關產品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
CAL-85-1細胞系相關產品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關產品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
CT26細胞系相關產品：H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
KTCTL140細胞系相關產品：H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
HOP-92細胞系相關產品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
H157細胞系相關產品：CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞
DMS-53細胞系相關產品：HPDEC細胞、Hs 695.T細胞、HL-7702細胞
MDA-MB 453細胞系相關產品：LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞
U251細胞系相關產品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
FET細胞系相關產品：CTLL-2細胞、N-Tera-2細胞、H-1563細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關產品：PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
C17細胞系相關產品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
Hi-5細胞系相關產品：HCC1438細胞、SNU-C2A細胞、As-PC1細胞
LC1sq細胞系相關產品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
PNT1/A細胞系相關產品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
SUM190PT細胞系相關產品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
HAVSMC細胞系相關產品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
H740細胞系相關產品：Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
NPA細胞系相關產品：Rabbit Kidney 13細胞、JB-6細胞、GM16136細胞
CMECs細胞系相關產品：H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關產品：OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
Panc-03.27細胞系相關產品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
SUM-159細胞系相關產品：NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關產品：SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
HEL299細胞系相關產品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關產品：C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關產品：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
MESSA/Dx5細胞系相關產品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
LK2細胞系相關產品：H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
PK-15 Thawing豬腎細胞系
NCTC929細胞系相關產品：OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞
LAD 2細胞系相關產品：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關產品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
Human ErythroLeukemia細胞系相關產品：EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞
SBC-3細胞系相關產品：HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
MKN7細胞系相關產品：Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
CORL88細胞系相關產品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
NIH3T3細胞系相關產品：MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
H220細胞系相關產品：H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
K7M2-WT細胞系相關產品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
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