"HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
ARH 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-14細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞、HET1A細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
COLO-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細(xì)胞、COV 434細(xì)胞、NMCG-1細(xì)胞
HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
NCIH2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞
NCI H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞
C17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-453細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞
A549-Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLM細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞
VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞
M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞
H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、P-36細(xì)胞、P3J細(xì)胞
NCIH2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-865細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞、143TK-細(xì)胞
NCI-H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞
HEL-92_1_7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞
Caki-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA-87細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
HuH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細(xì)胞、DHL10細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞
ECV304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
SW-48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 16細(xì)胞、H-2030細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞
HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-ori細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、LS-174細(xì)胞
COS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4C細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、CL-34細(xì)胞
SKml2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63-Ag8細(xì)胞、C-32細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞
U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞
HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、TM-4細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞
MUG-Chor1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細(xì)胞、L細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞
U937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-6細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞、SF 126細(xì)胞
NU-GC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞
TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞
HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞
A375-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746.T細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞
M-O7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE-T細(xì)胞、EFO27細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞
H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞
HCC9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7402細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞
BJ [Human fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞
Clone Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu65細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞
CHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞、MDA157細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
NCIH2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞
C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞
451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
A375-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞
LC1/Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞
Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞
QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞
HTR-8/SVneo Thawing人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞系
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
FHC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELA-GFP細(xì)胞、T-24細(xì)胞、S91細(xì)胞
Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/O-Ag14細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
IBMF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC/mHSC細(xì)胞、SW954細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞
PL 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞
"