"KMB-17 Thawing人二倍體細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
KMB-17 Thawing人二倍體細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KMB-17 Thawing人二倍體細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌,不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒(méi)有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
COS7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞
HS 445T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA.MB.435細(xì)胞、PK15細(xì)胞、L-cells細(xì)胞
AM-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞、HN-6細(xì)胞
T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞
Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞
HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞
GA-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3-L1細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞、K1細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞
H2052_MM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-368細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞
HCC-202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4細(xì)胞、Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、H-774細(xì)胞
JURKAT E-6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
H7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞
SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞
251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞、HN 4細(xì)胞
RH35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞
A-375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細(xì)胞、H35細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞
A-375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-229細(xì)胞、H35細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞
OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞
SK-Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞
KMB-17 Thawing人二倍體細(xì)胞系
DU-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRGEC細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞
HO8910PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞、NCI-H220細(xì)胞
SKMEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-134細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞、MV4II細(xì)胞
NU-GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-460細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
GM06141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細(xì)胞、THP 1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞
NCIH1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細(xì)胞、MH-S細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞
L 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞
VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞
U-937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC 11細(xì)胞、JM細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
HBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞、Reuber H35細(xì)胞
H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞
C57/B6-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs611T細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
H1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細(xì)胞、mREC細(xì)胞、HEC151細(xì)胞
WC00097細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0202細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞、SEM細(xì)胞
NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞
SNK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1882細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞
NCI-SNU-601細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞、H2591細(xì)胞
RK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2405細(xì)胞、HNE3細(xì)胞、SNU601細(xì)胞
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞
TE-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-Jiyoye細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞
NCI-H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞
Mv1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-361細(xì)胞、H1975細(xì)胞、P3X63細(xì)胞
KMB-17 Thawing人二倍體細(xì)胞系
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞
SK Mel28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:USMC細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞
L-M[TK-]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL 5細(xì)胞、H2286細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞
MiaPaca.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細(xì)胞、L-428細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
870細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞、EFO 27細(xì)胞
IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
AMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞、VP303細(xì)胞
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