"MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：MDA-MB-２３１來自患有轉(zhuǎn)移乳腺腺癌的５１歲女病人的胸水。在裸鼠和ALS處理的BALB/c小鼠中，它能形成低分化腺癌（III級）。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞
MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞
SK RC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞
OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
Calu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞
PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
EA. hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞
PAI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞
MuM-2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs688(A)T細胞、Calu6細胞、OV2008細胞
RPMI8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-1細胞、SMA-560細胞、BEL7404細胞
MOLT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
H4IIE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1975細胞、MNNG細胞、MEL-526細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 126細胞、DMS 114細胞、SK-ML2細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
MC57細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
E0771細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、BC-3-H-I細胞、kms 11細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
CCD841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-72細胞、MFM223細胞、U-343細胞
MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
HuT78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細胞、MHCC 97細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌細胞系
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞
PA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細胞、EJ-1細胞、K-562細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL-28細胞、T1-73細胞、Douglas Foster-1細胞
Nb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
NCIH647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
SUPB-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
MOLT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
KPL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
M-G63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-5細胞、SUIT-2細胞、HLE-B3細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
Karpas-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCM細胞、SHIN-3細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞
HCT FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細胞、MDCK supertube細胞、HO1-N-1細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
N-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
L-132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
MDA-MB-231-luc Thawing人乳腺癌細胞系
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K422細胞、OK細胞、H-1694細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
NCIH1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW260細胞、293細胞、MDA 435細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888 Lu細胞、KU.812細胞、HSC-T6細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
NEC8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞
RSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DH-L5細胞、TKB1細胞、UWB1.289細胞
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
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