"HCC78 Thawing人肺腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HCC78 Thawing人肺腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC78 Thawing人肺腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
EA. hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
JROECL21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
ANA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
OCILY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
MDA-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細胞、H87細胞、10RGB細胞
NIHOVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細胞、Panc_04_03細胞、KYSE 450細胞
H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC 96細胞、ABC-1細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
H-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細胞、RCSMC細胞、SkChA-1細胞
MCF 7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞
Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
ST-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
ST-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
Hs 274細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC-1細胞、TK-10細胞、AML 12細胞
FHC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HELA-GFP細胞、T-24細胞、S91細胞
HIBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
A375-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
HCC78 Thawing人肺腺癌細胞系
KMST-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
PC3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
L-5178-Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞
NCIH128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
CF PAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
SJRH 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細胞、GA-10(Clone 4)細胞、HVSMC細胞
COS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
PANC 203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞
Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
COLO320-DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
HBEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-2細胞、SKO3細胞、GM03571細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
Cloudman M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
RT-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
SKGT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
HDMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞
HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
U-373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
TK10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞
Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
N1E-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：87MG細胞、MDA-MB-175-VII細胞、AML193細胞
L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
HCC78 Thawing人肺腺癌細胞系
EVSAT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞
NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
b.End3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
RCC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞
SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
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