"ECC10 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
ECC10 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ECC10 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
CAL39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞
HT1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:190PT細(xì)胞、MKN1細(xì)胞、A-375細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
RFL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1197細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞
PF-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞
HTh74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1568細(xì)胞、KG1A細(xì)胞、KY-50細(xì)胞
WEHI231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
RPMI no. 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
H510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-5細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞
HC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞、HNSC細(xì)胞
GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞
D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞
NCI-SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRMC細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞
NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞
NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞
McCoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞、CA-46細(xì)胞
GM3190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4-11細(xì)胞、C17.2細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞
KM-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞
Panc 05.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMST6細(xì)胞、CMEC/D3細(xì)胞、NUGC-4細(xì)胞
ECC10 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
Okayama University Medical School-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-316細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
hTERT-RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAS細(xì)胞、MASMC細(xì)胞、TE32細(xì)胞
HBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞
293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞
MRCV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H524細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、D-283細(xì)胞
NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞
MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMC-1細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞
MCA205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞、293c18細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
SU-DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH8994細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞、H184A1細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
TE354T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細(xì)胞、RPMI6666細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
IM9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang Cells細(xì)胞、W256細(xì)胞、FTC133細(xì)胞
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
HCT-8/V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DR2R 1610細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞
Caco-2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞
CACO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG231細(xì)胞、HFB細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞
P116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞
Be Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞
DLD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AgC11x3A細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞
Tsup-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細(xì)胞、58F細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞
Rat-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00215A細(xì)胞、MDA231細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞
451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞
Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞
JURKAT E-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞
ECC10 Thawing人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
L 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞、H711細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞
FOX-NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細(xì)胞、C8161細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞
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