"IA-LM Thawing人大細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
IA-LM Thawing人大細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很?chē)?yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
IA-LM Thawing人大細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類(lèi),若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類(lèi)培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)和濃度,于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
FAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dunn LM8細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞
HT144-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細(xì)胞、C6細(xì)胞、IHH細(xì)胞
DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞
HDSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPsm細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞
AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞
H-1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞、HSC4細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
VP 267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞、GM03190細(xì)胞
Nthy ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-3細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞、RDES細(xì)胞
MOLP-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細(xì)胞、HSC-4細(xì)胞、SNU475細(xì)胞
UMRC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞
HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞
Madison lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-279細(xì)胞、A431細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞
HCT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、BT-B細(xì)胞
VM Cub 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1E細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞
32D CL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H87細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞
MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞
NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞
SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-3細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞、SHP-77細(xì)胞
Tu 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞
IA-LM Thawing人大細(xì)胞癌細(xì)胞系
NT2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
SKMEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone 3細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞、RGC6細(xì)胞
PF-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞
PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞
PL 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK 13細(xì)胞、HC-11細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞
CPAE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSRC2細(xì)胞、LS411細(xì)胞、SW48細(xì)胞
SHSY-5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-1細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN4細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞、MC38細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
Me Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB453細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞
HRCEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞
H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.Lu細(xì)胞、H-2122細(xì)胞、LA795細(xì)胞
B 95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細(xì)胞、KBM5細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞
SPC-A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H548細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞
Hep 3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT-1細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞、769-P細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細(xì)胞、JIII細(xì)胞、C8161細(xì)胞
Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞
NCI-H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT3細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
YTMLC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞
OUMS27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-177細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞
SW 962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly07細(xì)胞、MMAc.SF細(xì)胞、SNU-119細(xì)胞
HEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1116細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
Tn5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞
Hs-578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV411細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞、H-2126細(xì)胞
H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞
IA-LM Thawing人大細(xì)胞癌細(xì)胞系
RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞
CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞
CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
VP303細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞
NBL-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞
RPMI7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞
KYSE-410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞、BTT739細(xì)胞
C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HaCaT細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、Hs445細(xì)胞
NCI-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細(xì)胞、TE15細(xì)胞、BJ1細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
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