"EC9706 cell line人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
一般使用trypsin-EDTA 濃度為0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時，易造成培養(yǎng)基中細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，常規(guī)細(xì)胞傳代時建議用0.05%的胰酶進(jìn)行消化，對于難消化的細(xì)胞可采用0.25%胰酶進(jìn)行消化，細(xì)胞密度過高超過80%時，采用分步消化法。胰酶儲存在-20°C，解凍在4°C進(jìn)行，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于-20°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin之活性降低，并可減少污染之機(jī)會。胰酶消化的程度是細(xì)胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟：消化過度細(xì)胞碎片增多，黑渣子增多，細(xì)胞會成片脫落，嚴(yán)重影響細(xì)胞活性，并有部分細(xì)胞漂浮，隨棄去的胰酶流失；消化不足則細(xì)胞難于從瓶壁上吹下，反復(fù)吹打同樣也會損傷細(xì)胞活性。不同細(xì)胞對消化液的敏感性不同，胰酶消化的時間也會有差異。胰酶消化時間與胰酶的濃度，是否含EDTA，胰酶的儲存時間，胰酶的儲存溫度，是否反復(fù)凍融，消化加入的胰酶體積，消化溫度及細(xì)胞的密度有關(guān)。對于新購買的細(xì)胞，建議客戶先用低濃度的胰酶仔細(xì)去摸索一下消化時間，可每隔1分鐘鏡下觀察細(xì)胞是否變圓，記錄消化時間，下一次操作參考之前的記錄來控制時間即可。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EC9706 cell line人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無菌意識要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置，其它個人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計時，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀斐沙恋砦镏@著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
貼壁細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：細(xì)胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細(xì)胞懸液中；不同細(xì)胞消化時間有差異，以實(shí)際鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)，大部分細(xì)胞回縮變圓并有少量細(xì)胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右，細(xì)胞處于對數(shù)生長期時進(jìn)行凍存操作，確保細(xì)胞凍存時狀態(tài)，凍存密度可根據(jù)細(xì)胞特性進(jìn)行調(diào)整；凍存細(xì)胞保存溫度應(yīng)低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細(xì)胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準(zhǔn)備凍存的細(xì)胞；顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細(xì)胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細(xì)胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標(biāo)簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備事項(xiàng)：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細(xì)胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細(xì)胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用；程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。
EC9706 cell line人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
H-1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞、HSC4細(xì)胞
MMAc-Serum Free細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細(xì)胞、TE-4細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞
HSKMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞
PC3M-2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO684細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞
Panc8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞
RCC-10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2細(xì)胞、HCC0038細(xì)胞、NHLF細(xì)胞
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
CCC-HEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF763細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞
RBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞
SKOV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1703細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞、MC-26細(xì)胞
SUPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887A細(xì)胞、JAR細(xì)胞、Tu177細(xì)胞
QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞
EC9706 cell line人食管癌細(xì)胞系
HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞
Panc8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIHA細(xì)胞、H-1437細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞
SR-786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞
HGF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞
MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
Kasumi-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1623細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞
HEC151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Monomac-1細(xì)胞、LN-382細(xì)胞、253J細(xì)胞
DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞
A-204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 205細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞
MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
TALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VERO76細(xì)胞、293-H細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞
ARH-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL-6細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
HuH 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞
U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞
HCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞
MRMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOEC細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞、CORL88細(xì)胞
HuT78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR1-K細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞
GM02131A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
HOMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞
Me Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞
X63-AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-5細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞、H-157細(xì)胞
JROECL 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
HCT_116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞、WB F344細(xì)胞
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞
EC9706 cell line人食管癌細(xì)胞系
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
NCI-H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL2141細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞
CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1395細(xì)胞、Sf-21細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL-6A/C1細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
MMAc-Serum Free細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞
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